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鞏固練習,1、培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗者的雙手、空氣所采用的滅菌、消毒方法依次是( ) ①化學消毒 ②灼燒滅菌 ③干熱滅菌 ④紫外線滅菌 ⑤高壓蒸汽滅菌 ⑥巴氏消毒法 A．⑤③②①④ B．①②③④⑤ C．⑥②③④① D．③④②①⑥,,2、獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是 ( ) Ａ．將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具、培養(yǎng)基等進行滅菌 Ｂ．接種純種細菌 Ｃ．適宜環(huán)境條件下培養(yǎng) Ｄ．防止外來雜菌的入侵,鞏固練習,,3、下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，請回答：,（1）物理性質(zhì)，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。依用 途劃分，則屬于________培養(yǎng)基。 ⑵根據(jù)培養(yǎng)基原料，所培養(yǎng)微生物的同化作用的類型 是 ___________。（異養(yǎng)型/自養(yǎng)型）,固體,選擇,異養(yǎng)型,實驗操作：純化大腸桿菌,純化大腸桿菌,1、本實驗所用的培養(yǎng)基是牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,2、本實驗可分成配制培養(yǎng)基和純化大腸桿菌兩個階段。,（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,1.計算：,根據(jù)配方比例，計算配制100mL培養(yǎng)基的用量,2.稱量：,3.溶化：,將各成分加水溶解并定容至100mL。,4.滅菌：,培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿,5.倒平板：,思考3：在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的稱量操作中，動作要迅速，原因是什么？,（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,防止牛肉膏吸收空氣中的水分,思考4：溶化操作中需要不斷用玻璃棒攪拌的目的是什么？,防止瓊脂糊底而導致燒杯破裂,5.倒平板,待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時在酒精燈火焰附近操作,①在火焰旁右手拿 _______，左手 _______.,錐形瓶,拔出棉塞,5.倒平板,待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時在酒精燈火焰附近操作,①,②,③,④,②錐形瓶的瓶口 ________________。,迅速通過火焰,5.倒平板,待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時在酒精燈火焰附近操作,①,②,③,④,③左手將培養(yǎng)皿 ______________,右手 ___________________, 立刻蓋上皿蓋。,打開一條縫隙,將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,5.倒平板,待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時在酒精燈火焰附近操作,①,②,③,④,④待平板冷卻凝固后，將平板 ________________。,倒過來放置,5.倒平板,思考5：錐形瓶的瓶口通過火焰的目的是什么？,消滅瓶口雜菌，防止雜菌感染培養(yǎng)基。,思考6：倒平板的目的是什么？,防止培養(yǎng)基冷卻過程中形成的水滴落到培養(yǎng)基表面。,思考7：若皿蓋和皿底之間粘有培養(yǎng)基，則該平板能否培養(yǎng)微生物？為什么？,不能，空氣中的雜菌會在這些粘附培養(yǎng)基上繁殖，并污染皿內(nèi)的培養(yǎng)基。,二、純化大腸桿菌,1.平板劃線法,用帶有微生物的接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面通過連續(xù)劃線而純化分離微生物的一種方法。,二、純化大腸桿菌,1.平板劃線法,二、純化大腸桿菌,1.平板劃線法,5.將菌種試管口再次通過火焰 后塞上棉塞,二、純化大腸桿菌,1.平板劃線法,7.灼燒接種環(huán)，冷 卻后從第一區(qū)劃線 末端開始向第二區(qū) 域內(nèi)劃線。重復上 述過程，完成三、 四、五區(qū)域內(nèi)劃線。 注意不要將第五區(qū) 的劃線與第一區(qū)劃 線相連。,8.將平板倒置 放在培養(yǎng)箱中 培養(yǎng),思考8：取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是什么？,二、純化大腸桿菌,消滅接種環(huán)上的微生物。,為什么除第一次劃線外，其余劃線前都要灼燒接種環(huán)？,消滅接種環(huán)上的殘留菌種。,取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進行，其目的是？,防止高溫殺死菌種,最后灼燒接種環(huán)的目的是？,防止細菌污染環(huán)境和操作者,在第1次劃線后都從上次劃線末端開始的目的是？,獲得由單個細菌形成的標準菌落,