2019-2020年高中生物 1.2《基因工程的基本操作程序》教案全集 新人教版必修3.doc
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2019-2020年高中生物 1.2《基因工程的基本操作程序》教案全集 新人教版必修3 課題 1.2 基因工程的基本操作程序 主備人 上課時(shí)間 編號(hào) 3 教師 教學(xué)重點(diǎn) 基因工程的基本操作程序的四個(gè)步驟 教學(xué)難點(diǎn) 1. 從基因文庫(kù)中獲取目的基因 2、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 教 學(xué) 目 標(biāo) 知識(shí) 目標(biāo) 簡(jiǎn)述基因工程的原理和技術(shù) 能力 目標(biāo) 1、通過對(duì)書中插圖、照片等的觀察,學(xué)會(huì)科學(xué)的觀察方法,培養(yǎng)觀察能力。 2、通過對(duì)基因工程的基本操作程序的學(xué)習(xí),使學(xué)生在理解步驟的同時(shí),舉一反三,對(duì)于其他基因工程操作實(shí)例做到能理解、能介紹,從而培養(yǎng)學(xué)生對(duì)相關(guān)知識(shí)的理解能力及良好的語(yǔ)言表達(dá)能力。 情感 目標(biāo) 3、通過引導(dǎo)學(xué)生在網(wǎng)上的探究活動(dòng),引導(dǎo)學(xué)生主動(dòng)參與,樂于探究,培養(yǎng)學(xué)生收集和處理科學(xué)信息的能力、獲取新知識(shí)的能力、分析和解決問題的能力及交流與合作的能力。 教學(xué)媒體 多媒體課件 教學(xué)過程 教學(xué)內(nèi)容 教師的組織和引導(dǎo) 個(gè)人札記 一、目的基因的獲取 二.基因表達(dá)載體的構(gòu)建 三.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 四、目的基因的檢測(cè)和鑒定 復(fù)習(xí)提問: 1.DNA重組技術(shù)的基本工具有那些,各自的作用和特點(diǎn)是什么? 2.我們所學(xué)過的育種方法有那些?其中基因工程育種有那些優(yōu)點(diǎn)? 導(dǎo)入:通過基因工程的概念我們可知,我們能夠應(yīng)用DNA重組技術(shù)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)賦予生物以新的遺傳特征,但是無論是DNA重組技術(shù)還是轉(zhuǎn)基因技術(shù)都需要找到對(duì)我們有利的目的基因,我們?cè)撊绾稳ふ夷康幕蚰?,目的基因又將如何連接到載體上哪,以及如何將載體導(dǎo)入受體?這些都是我們所要共同探究的問題!現(xiàn)在讓我們共同學(xué)習(xí)一下1.2基因工程的基本操作。 思考1.我們?cè)谇懊嫣岬降奶K云芽孢桿菌中的抗蟲基因、胰島素基因、干擾素基因等都可以作目 的基因。可是要在浩瀚的“基因海洋”中,找到特定的目的基因可以用什么樣的方法和途徑呢? 2、基因工程的基本操作程序主要包括: 、 、 新課教學(xué): 基因工程的基本操作步驟主要包括:目的基因的獲?。换虮磉_(dá)載體的構(gòu)建;將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;目的基因的檢測(cè)與鑒定。 一.目的基因的獲取 1.目的基因:主要是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。 2.目的基因的獲取方法: 基因組文庫(kù) 從基因文庫(kù)中獲取 鳥槍法 cDNA文庫(kù) 人工合成 (1)從基因文庫(kù)中獲取 基因文庫(kù):將含有某種生物不同基因的許多DNA片段,導(dǎo)入受體菌的群體儲(chǔ)存,各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因。 構(gòu)建基因文庫(kù)的目的:為了在不知目的基因序列的情況下,便于獲得所需的目的基因。 基因組文庫(kù):含有一種生物的所有基因。 部分基因文庫(kù)(如cDNA文庫(kù)):含部分基因,可由mRNA反轉(zhuǎn)錄而來。 (2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 PCR:是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。 原理:DNA雙鏈復(fù)制 原料:模板DNA;RNA引物;四種脫氧核苷酸;熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);離子 方法:DNA受熱變性解旋為單鏈、冷卻后RNA引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合、DNA聚合酶作用下延伸合成互補(bǔ)鏈。 特點(diǎn):指數(shù)形式擴(kuò)增 二.基因表達(dá)載體的構(gòu)建 1.目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在;可以遺傳給下一代;使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。 目的基因: 2.基因表達(dá) 啟動(dòng)子:位于基因首端,RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄基因 載體的組成 終止子:位于基因尾端,使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停下來 標(biāo)記基因:鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因 3.方法:同種限制酶分別切割載體和目的基因,再用DNA連接酶把兩者連接。 目的基因與運(yùn)載體結(jié)合(以質(zhì)粒為運(yùn)載體) 4.條件:同種限制酶、DNA連接酶、ATP(目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因) 三.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 轉(zhuǎn)化:目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。 ① 導(dǎo)入植物細(xì)胞:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌,再讓農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞) 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞: 細(xì)菌 ↓氯化鈣 細(xì)胞壁的通透性增大 ↓ 重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞 ↓ 目的基因隨受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制 ②導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞:顯微注射法(將基因表達(dá)載體提純,用顯微儀注射到受精卵中) ③導(dǎo)入微生物細(xì)胞:Ca2+處理受體細(xì)胞成為感受態(tài)細(xì)胞,再進(jìn)行混合。 提示:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是利用農(nóng)桿菌(胞內(nèi)寄生菌)對(duì)植物的感染而把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。 四.目的基因的檢測(cè)和鑒定 ①檢測(cè)是否插入目的基因,利用DNA分子雜交技術(shù),目的基因DNA一條鏈(作探針)與受體細(xì)胞中提取的DNA雜交,看是否有雜交帶。 ②檢測(cè)是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,利用DNA分子雜交技術(shù),目的基因DNA一條鏈(作探針)與受體細(xì)胞中提取的mRNA雜交,看是否有雜交帶。 ③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)??贵w與蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原-抗體雜交,看是否有雜交帶。 ④還可以進(jìn)行個(gè)體水平的鑒定,根據(jù)其性狀。 提示:①DNA分子雜交技術(shù)首先提取受體細(xì)胞中的DNA,然后高溫解成單鏈,再與同位素標(biāo)記的DNA探針雜交;②抗原-抗體雜交所用到的抗體是用表達(dá)出的蛋白質(zhì)注射動(dòng)物進(jìn)行免疫,產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,并提取出而來的。 目的基因主要是指能編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。 從基因文庫(kù)中獲取目的基因的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,缺點(diǎn)是工作量大,具有一定的盲目性。 由于真核細(xì)胞的基因含有不表達(dá)的DNA片段,不能直接用于基因的擴(kuò)增和表達(dá),因此,在獲取真核細(xì)胞中的目的基因時(shí),一般是用人工合成目的基因的方法。 為保證目的基因與載體能夠結(jié)合,在切割載體和目的基因時(shí)要用同一種限制酶 課堂鞏固 學(xué)案與測(cè)評(píng) 作 業(yè) 板書設(shè)計(jì): 1.2 基因工程的基本操作程序 一、 目的基因的獲取 二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建 (基因工程的核心) 三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 四、目的基因的檢測(cè)和鑒定 課后筆記: 教學(xué)中加強(qiáng)預(yù)習(xí)環(huán)節(jié),先解決為什么要分四個(gè)步驟的問題,然后解決每一步驟的技術(shù)方法問題;通過教學(xué)媒體的運(yùn)用,解決每一程序中的技術(shù)難點(diǎn)。- 1.請(qǐng)仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對(duì)于不預(yù)覽、不比對(duì)內(nèi)容而直接下載帶來的問題本站不予受理。
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