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專題九 生物技術(shù)實(shí)踐,第18講 微生物的應(yīng)用和生物技術(shù) 在食品加工中的應(yīng)用,-3-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,命題點(diǎn)一微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 1.基本技術(shù) (1)制備培養(yǎng)基:計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。 (2)無菌技術(shù):主要指消毒和滅菌。 ①消毒方法:常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。 ②常用滅菌方法: 灼燒滅菌——接種環(huán)、接種針等金屬器具; 干熱滅菌——主要針對玻璃器皿等; 高壓蒸汽滅菌——主要針對培養(yǎng)基等。 (3)倒平板操作:待培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右時,在酒精燈火焰附近倒平板。 (4)平板劃線操作:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。,-4-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,(5)稀釋涂布平板法:先將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋后涂布平板,在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散到培養(yǎng)基的表面,從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。如下圖所示:,-5-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,2.微生物的分離與計數(shù),-6-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,-7-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,-8-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,思維拓展 (1)平板劃線法適用于微生物的純化,但不能用于微生物的計數(shù)。 (2)土壤中纖維素分解菌的篩選流程中的“選擇培養(yǎng)”是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定。,-9-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,運(yùn)用不同培養(yǎng)基的原理解答有關(guān)微生物分離和鑒定的題 (2015甘肅河西三校一聯(lián))回答下列關(guān)于微生物培養(yǎng)的問題。高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選了能高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌,其篩選過程如下圖所示。,-10-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,(1)從用途上來說,Ⅰ號培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基;從物理狀態(tài)上來說,Ⅱ號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,配制時一般要加入 。 (2)進(jìn)行①過程的目的是 ,②過程是為了 ;②過程所使用的接種方法是 。 (3)Ⅰ、Ⅱ號培養(yǎng)基配制和滅菌時,滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是 。 (4)一般對配制的培養(yǎng)基采用 法滅菌,對接種環(huán)采用 滅菌,其中“滅菌”是指 。 (5)在高溫淀粉酶運(yùn)用到工業(yè)生產(chǎn)前,需對該酶的 和 進(jìn)行測定。,答案,-11-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,方法規(guī)律 選擇培養(yǎng)基及鑒別培養(yǎng)基的運(yùn)用技巧 (1)分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)中先用選擇培養(yǎng)基,再用鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基,以纖維素作為唯一碳源,以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長,而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長;利用液體培養(yǎng)基能使?fàn)I養(yǎng)成分被充分利用,以增加纖維素分解菌的濃度。 (2)鑒別培養(yǎng)基含瓊脂,為固體培養(yǎng)基,因?yàn)橐谂囵B(yǎng)基上形成我們?nèi)庋劭梢姷木?。剛果紅染色法就是應(yīng)用的此培養(yǎng)基。,-12-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,(2015山東煙臺診斷測試)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料,但是不經(jīng)過細(xì)菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多,同學(xué)們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用,設(shè)計了以下實(shí)驗(yàn),并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌),培養(yǎng)基成分如下表所示,實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示,請回答下列問題。,-13-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,(1)此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)? ,理由是 。 (2)培養(yǎng)基中的氮源是 ,這種培養(yǎng)基在功能上屬于 培養(yǎng)基,目的是只允許能合成 的微生物生長,其他微生物均不能生長。 (3)欲從土壤中分離獲取上述特定微生物,可采用 法進(jìn)行接種。 (4)在以尿素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入 ,使指示劑變紅色,而篩選纖維素分解菌的方法是 法。,答案,-14-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,命題點(diǎn)二傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 1.制作果酒、果醋、腐乳、泡菜所需菌種的比較,-15-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,2.果酒、果醋、腐乳及泡菜的制作原理及過程,-16-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,-17-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,掌握微生物發(fā)酵原理,解答有關(guān)果醋、果酒、腐乳、泡菜制作的題 微生物在人們的生活生產(chǎn)中無處不在,為人們生活增添了諸多樂趣。 (1)很多家庭都會釀酒,請完成下列相關(guān)問題。 ①釀酒時先將米煮熟的目的是 。 ②冷卻到30 ℃后才能加酒藥的原因是 。 ③如果時常開壇蓋舀酒,不久酒就會變酸,其原因是 。,-18-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,(2)中國的臭豆腐馳名中外,歷史悠久。臭豆腐外觀青色,“聞著臭,吃著香”。在臭豆腐的制備過程中,常用的微生物主要是 ,在此過程中,豆腐相當(dāng)于微生物生長的 。 (3)在腌制泡菜的過程中,起主要作用的微生物是 ,用水封壇的作用是 ;欲檢測泡菜在腌制過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量,使用檢測試劑后顏色的變化是 。,答案,-19-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,方法規(guī)律 微生物發(fā)酵過程中的滅菌措施 應(yīng)該從原料、裝置和實(shí)驗(yàn)過程三個層次進(jìn)行無菌操作。 (1)果酒與果醋制作中原料的消毒 ①榨汁前葡萄應(yīng)先沖洗再去枝梗,因?yàn)槿粝热ス?則會使一些微生物侵入果實(shí)內(nèi)部,影響果酒的制作;②體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精殺菌效果最強(qiáng),若酒精濃度過低,則殺菌效果差,而濃度過高,又會使菌體表面蛋白質(zhì)凝固形成一層保護(hù)膜,乙醇分子不能滲入其中,從而使殺菌效果受到影響。 (2)腐乳制作過程中的殺菌消毒 ①制作腐乳的玻璃瓶洗刷干凈后用沸水消毒;②酒、鹽、香辛料都有殺菌作用;③接種、封瓶時都要進(jìn)行無菌操作。,-20-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,(2015江蘇揚(yáng)州質(zhì)檢)蘋果除鮮食外,還可深加工為果酒、果醋、果汁、果醬等,使產(chǎn)品附加值成倍提高。下圖是某廠進(jìn)行蘋果酒和蘋果醋生產(chǎn)的基本工藝流程。請回答下列問題。,-21-,命題點(diǎn)一,命題點(diǎn)二,整合提升,題型突破,題組訓(xùn)練,(1)蘋果的出汁率是果酒、果醋產(chǎn)量的保證。在制備蘋果酒的過程中,為了提高蘋果的出汁率,在壓榨前可加入一定濃度的 酶和果膠酶,理由是這兩種酶能 ,從而提高蘋果的出汁率。 (2)發(fā)酵一定時間后,觀察到甲罐內(nèi)液面不再有 ,說明發(fā)酵基本完畢。 (3)在制備蘋果醋的過程中,乙罐內(nèi)先填充經(jīng)滅菌處理后的木材刨花,然后加入含 菌的培養(yǎng)液,使該菌附著在刨花上,再讓甲罐中發(fā)酵完畢的蘋果酒流入乙罐,并在A處通入 。蘋果醋發(fā)酵時控制的適宜溫度一般比制蘋果酒時的適宜溫度 (填“高”“相等”或“低”)。,答案,-22-,失分誤區(qū),對選擇培養(yǎng)基的選擇方法辨析不清 防范策略 (1)在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)。例如,加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌;加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的加入是在主要營養(yǎng)成分完整的基礎(chǔ)上加入。 (2)改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。例如,缺乏氮源時可以分離出固氮微生物;石油作為唯一碳源時,可以分離出能消除石油污染的微生物。 (3)改變微生物的培養(yǎng)條件。例如,將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境下培養(yǎng),可以得到耐高溫的微生物。,-23-,失分誤區(qū),防范演練 (2015河北保定模擬)某實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌,設(shè)計實(shí)驗(yàn)步驟如下,請給予合理的補(bǔ)充。 (1)采樣與培養(yǎng):將采集的土樣混勻后稱取1 g,置于經(jīng)過 法滅菌處理的 (填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基中,28 ℃振蕩培養(yǎng)。 (2)接種與選擇:為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高,需將培養(yǎng)液進(jìn)行 處理。之后,將菌液涂布接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,30 ℃條件下培養(yǎng)。為避免污染,需將培養(yǎng)皿呈 狀態(tài)放置。此外,為排除其他因素的影響,提高實(shí)驗(yàn)可信度,本步驟需設(shè)計 作為空白對照。,-24-,失分誤區(qū),(3)篩選與純化:將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍,如果菌落周圍的現(xiàn)象是 ,則說明此種菌能夠 。從平板中挑取實(shí)驗(yàn)效果明顯的目的菌株,采用 法接種于新的培養(yǎng)基平板,可對菌株進(jìn)行進(jìn)一步的純化。 我的失分點(diǎn):,答案,