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2019-2020年高中生物 專題二 細胞工程 2.2.2 動物細胞融合與單克隆抗體課時作業(yè) 新人教版選修3 目標導航　1.掌握動物細胞融合的原理和方法。2.結(jié)合圖2－24，歸納單克隆抗體的制備過程及應用。 一、動物細胞融合(閱讀P52－53) 1．概念：兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程，也稱細胞雜交。 2．原理：細胞膜的流動性。 3．誘導融合的方法：(1)物理、化學方法：與植物體細胞雜交相同，如聚乙二醇、電激等。 (2)生物方法：滅活的病毒。 4．過程：不同遺傳信息的兩個或多個細胞雜交細胞。 5．結(jié)果：形成雜交細胞。 6．意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。如：利用動物細胞融合技術(shù)，為制造單克隆抗體開辟了新途徑。 二、單克隆抗體(閱讀P52－54) 1．傳統(tǒng)抗體的獲得 (1)方法：①向動物體內(nèi)反復注射某種抗原，使動物產(chǎn)生抗體；②從動物血清中分離所需抗體。 (2)缺陷：產(chǎn)量低、純度低、特異性差。 2．單克隆抗體的制備 (1)制備原理 ①漿細胞特點：一種B淋巴細胞產(chǎn)生一種單一抗體，B淋巴細胞在體外不能(能/不能)無限增殖。 ②骨髓瘤細胞特點：能無限增殖。 ③雜交瘤細胞特點：B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合得到雜交瘤細胞，既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。 (2)制備過程 制備特異性 ①向小鼠注射特定抗原蛋白 ②從小鼠脾臟中獲取相應B淋巴細胞 B淋巴細胞 　? 獲得雜交 ①將鼠的骨髓瘤細胞與脾中形成的B淋巴細胞融合 ②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生專一的抗體) 瘤細胞 　? 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測 　? 將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔中增殖 　? 提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取 (3)單克隆抗體優(yōu)點：特異性強、靈敏度高、并可大量制備。 (4)單克隆抗體的應用 ①作為診斷試劑，具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。 ②用于治療疾病和運載藥物。 判斷正誤： (1)動物細胞融合也稱細胞雜交，使遠緣雜交成為現(xiàn)實。(　　) (2)動物細胞融合常用的誘導因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等。(　　) (3)動物細胞融合的主要用途是制備克隆動物。(　　) (4)雜交瘤細胞是由經(jīng)免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合而成的，具有既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的能力。(　　) (5)單克隆抗體最主要的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高，并能大量制備。(　　) (6)單克隆抗體可以用于治療疾病。(　　) (7)動物雜交瘤細胞產(chǎn)生單克隆抗體能體現(xiàn)細胞的全能性。(　　) (8)動物細胞核融合發(fā)生在雜種細胞的有絲分裂過程中。(　　) 答案　(1)　(2)√　(3)　(4)√　(5)√　(6)√　(7)　(8)√ 一、動物細胞融合 1．對細胞膜融合過程的理解 (1)細胞融合的過程包括細胞膜的融合、細胞質(zhì)融合和細胞核融合，其中細胞膜的融合是細胞融合的先導，在細胞膜融合中體現(xiàn)出細胞膜具有流動性。 (2)誘導融合的方法有滅活的病毒(最常見)、聚乙二醇(PEG)和電激等。 2．動物細胞融合與植物體細胞雜交的對比 比較項目 植物體細胞雜交 動物細胞融合 原理 細胞膜的流動性、細胞的全能性 細胞膜的流動性 細胞融 合方法 用纖維素酶、果膠酶去除細胞壁后誘導原生質(zhì)體融合 用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細胞分散后，誘導細胞融合 誘導手段 離心、電激、振動、聚乙二醇等誘導 與植物體細胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導 結(jié)　果 形成雜種植株 形成雜種細胞，以生產(chǎn)細胞產(chǎn)品 用　途 克服遠緣雜交不親和的障礙，擴展雜交親本范圍，培育新品種 制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等 意義 突破有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能 1．動物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合所用的誘導方法有何不同？ 答案　動物細胞融合可用滅活的病毒進行誘導。 2．細胞融合技術(shù)與有性雜交相比有哪些優(yōu)點？ 答案　有性雜交有著十分嚴格的時空關(guān)系和物種界限。動物細胞融合則不同，它通過人工的方法克服了存在于物種之間的遺傳屏障，從而能夠按照人們的意愿，把不同物種的不同組織類型的細胞融合在一起。 3．動物細胞融合和受精作用的區(qū)別有哪些呢？ 答案　(1)受精作用是在同種生物之間進行的，精子與卵細胞的融合不需要任何誘導劑就能形成受精卵，受精卵內(nèi)具備同種生物的兩個親本的遺傳物質(zhì)。 (2)動物細胞融合是在不同物種間進行的細胞融合，由于物種間存在生殖隔離，所以在自然條件下不能融合成雜交細胞，必須有誘導劑作用才能融合。形成的雜交細胞具備兩個親本細胞的遺傳物質(zhì)，從而體現(xiàn)兩個親本的遺傳特性。 4．動物細胞融合完成的標志是什么？ 答案　動物細胞融合完成的標志是來自不同細胞的兩個或多個細胞核融合成一個細胞核。 1．與植物體細胞雜交相比，動物細胞融合的原理及其特有的誘導因素分別是(　　) A．細胞膜的流動性、離心 B．細胞膜的流動性、滅活的病毒 C．細胞的全能性、電刺激 D．細胞的全能性、滅活的病毒 問題導析　(1)植物體細胞雜交的原理是細胞膜的流動性、細胞的全能性，動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性。 (2)動物細胞融合的常用誘導因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等，其中滅活的病毒是其特有的誘導因素，而聚乙二醇、電激均可用于誘導植物體細胞雜交。 答案　B 一題多變 判斷正誤： (1)動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。(　　) (2)動物細胞融合后形成的具有原來兩個或多個動物細胞遺傳信息的雙核或多核細胞稱為雜交細胞。(　　) (3)常用的誘導動物細胞融合的因素有：聚乙二醇、滅活的病毒、電激、離心等。(　　) (4)細胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。(　　) 答案　(1)√　(2)　(3)√　(4)√ 二、單克隆抗體 1．單克隆抗體和常規(guī)抗體的比較 項目 分泌抗體的細胞 特點 生產(chǎn) 單克隆抗體 雜交瘤細胞 特異性強、靈敏度高 產(chǎn)量高，易純化分離 常規(guī)抗體 B淋巴細胞 特異性差、靈敏度低 產(chǎn)量低，分離困難 2.單克隆抗體的制備及應用 (1)原理：要獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B淋巴細胞，形成細胞群；將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，其原因如下： ①每一個B淋巴細胞只能分泌一種特異性抗體；不同種類的B淋巴細胞分泌的抗體不同。 ②B淋巴細胞在體外培養(yǎng)時不能無限增殖；骨髓瘤細胞能無限增殖。 ③B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的雜交細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。 (2)單克隆抗體的制備過程： (3)單克隆抗體的應用 ①作為診斷試劑：能準確識別各種抗原物質(zhì)的細微差異，并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。 ②用于治療疾病和運載藥物 單獨使用：直接用于癌癥或其他疾病的治療(作為藥物本身)。 綜合使用：與放射性同位素、化學藥物或細胞毒素相結(jié)合，制成“生物導彈”，主要用于治療癌癥，也可少量用于其他疾病的治療。 1．仔細觀察教材P53圖2－24，探討下列問題： (1)制備單克隆抗體過程中的幾種細胞有何特點？ 答案　①免疫的B淋巴細胞：能產(chǎn)生單一抗體，但不能無限增殖。②骨髓瘤細胞：能無限增殖，不能產(chǎn)生抗體。③雜交瘤細胞：既能產(chǎn)生特定的抗體，又能在組織培養(yǎng)條件下進行無限增殖。 (2)單克隆抗體制備過程中有兩次篩選，其目的分別是什么？ 答案　第一次篩選是在B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合之后，篩選出只有B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的雜種細胞。第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。 2．用單克隆抗體及相關(guān)物質(zhì)制成的“生物導彈”中真正起治療作用的物質(zhì)是什么？是單克隆抗體嗎？ 答案　“生物導彈”中真正發(fā)揮治療作用的物質(zhì)是相關(guān)“藥物”，單克隆抗體所起的作用在于將藥物定向帶到靶細胞所在位置，借助其導向作用，在原位殺死癌細胞，這樣既不損傷正常細胞，又減少了用藥劑量。因此，“生物導彈”可作為一種療效高、毒副作用小的新型藥物。 3．若不采用動物細胞融合的方法，能否生產(chǎn)出單克隆抗體？試簡要說明。 答案　能?？蓮慕?jīng)免疫的B淋巴細胞中獲取決定所需抗體的基因(目的基因)，導入骨髓瘤細胞，然后培養(yǎng)骨髓瘤細胞并從培養(yǎng)液中提取分泌物，便可得到單克隆抗體。 2．單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞融合后，要用特定的培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是(　　) ①B淋巴細胞?、谛∈蠊撬枇黾毎、跙淋巴細胞自身融合細胞?、苄∈蠊撬枇黾毎陨砣诤霞毎、蓦s交瘤細胞 A．①②③④ B．①②③ C．②④ D．②③ 問題導析　(1)單克隆抗體的制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞融合時，有三種情況：未發(fā)生融合的細胞；自身融合的細胞；骨髓瘤細胞與單個B淋巴細胞融合的雜交瘤細胞。 (2)在特定的培養(yǎng)基上只有雜交瘤細胞才能存活增殖。 答案　A 一題多變 判斷正誤： (1)制備單克隆抗體所用的B淋巴細胞是經(jīng)過免疫的B淋巴細胞。(　　) (2)細胞融合之后需要一次篩選，方可獲得能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞。(　　) (3)利用單克隆抗體制成的“生物導彈”，其選擇性是由藥物決定的，與抗體無關(guān)。(　　) 答案　(1)√　(2)　(3) 1．下列關(guān)于動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，敘述正確的是(　　) A．誘導融合的方法完全相同 B．所用的技術(shù)手段完全相同 C．所采用的原理完全相同 D．都能形成雜種細胞 答案　D 解析　兩種細胞工程技術(shù)都要進行細胞融合，但融合的方法不完全相同；誘導的方法，除動物細胞的融合常用滅活的病毒做誘導劑外，其他的兩者基本相同；兩者采用的原理不同，動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性，最終形成的是雜種細胞。植物體細胞雜交的原理有細胞膜的流動性和細胞的全能性。故正確答案為D。 2．單克隆抗體在醫(yī)療、診斷等方面發(fā)揮著越來越重要的作用。英國科學家米爾斯坦和科勒設(shè)計了一個用已免疫的B淋巴細胞制備單克隆抗體的實驗，下圖為其實驗流程圖。則相關(guān)的敘述或說法中，不正確的是(　　) A．a(chǎn)是骨髓瘤細胞，②表示在選擇培養(yǎng)基上進行培養(yǎng) B．制備單克隆抗體時，選擇B淋巴細胞的原因是它只能分泌多種特異性抗體 C．③過程如在體外培養(yǎng)，則需要無菌、無毒，營養(yǎng)充足，溫度、pH適宜等環(huán)境條件 D．誘導動、植物細胞融合常用的一種化學誘導劑是聚乙二醇 答案　B 解析　對于B淋巴細胞來說，每一種B淋巴細胞經(jīng)特定抗原刺激只能產(chǎn)生一種特異性抗體。根據(jù)單克隆抗體制備的流程判斷：a是骨髓瘤細胞、b是雜交瘤細胞。①是誘導B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的過程。②表示在選擇培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)、篩選能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞。③包括體外培養(yǎng)和注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)。選擇培養(yǎng)基只允許雜交瘤細胞生長、增殖，其他細胞不能生存。動物細胞培養(yǎng)需具備的條件是：無菌、無毒，營養(yǎng)充足，溫度適宜，pH適宜，充足的空氣。誘導細胞融合時常用聚乙二醇作誘導劑。 3．下面為制備單克隆抗體過程示意圖，下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　) A．④中的篩選是為了獲得能產(chǎn)生多種抗體的雜交瘤細胞 B．②中培養(yǎng)基應加入選擇性抑制骨髓瘤細胞DNA分子復制的物質(zhì) C．上圖中有一處明顯錯誤 D．⑤可以無限增殖 答案　A 解析?、苤械暮Y選是為了獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；②中培養(yǎng)基應加入選擇性抑制骨髓瘤細胞DNA分子復制的物質(zhì)，這樣才能篩選出雜交瘤細胞；圖中的小鼠沒有經(jīng)過免疫處理，應該注射相應的抗原，小鼠才能形成相應的B淋巴細胞。 4．科學家從某些能無限增殖細胞的細胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)許多動物細胞的分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請回答下面的問題： (1)利用細胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，一般選用的是____________和____________________融合。 (2)有人提出，可以直接通過基因工程導入該調(diào)控基因來制備單克隆抗體，其思路如圖所示。 ①酶A是指____________，酶B是指____________。 ②對已導入重組質(zhì)粒的Ⅱ進行“檢測”的原因是_______________________________；Ⅲ指代的細胞具有的特點__________________________________________________。 ③有人提出用細胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細胞來生產(chǎn)單克隆抗體，試用相關(guān)的圖示及文字表示該過程：________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 答案　(1)骨髓瘤細胞　經(jīng)過免疫的B淋巴細胞(漿細胞)　(2)①限制酶　DNA連接酶?、趯氤晒β屎艿汀〖饶軣o限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體 ③如圖所示 解析　(1)制備單克隆抗體選用的融合細胞一般為骨髓瘤細胞(能無限增殖)與經(jīng)過免疫的B淋巴細胞(能產(chǎn)生 特異性抗體)。(2)圖示Ⅰ過程為獲取目的基因，需用限制酶切取出目的基因片段；由于目的基因?qū)氤晒β什⒉桓?，故常需進行導入檢測；由于Ⅲ的細胞具有“無限增殖”的調(diào)控基因，故可進行無限增殖，從而產(chǎn)生大量的單克隆抗體。 基礎(chǔ)鞏固 1．關(guān)于動物細胞融合的說法，不正確的是(　　) A．動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程 B．動物細胞融合后形成的具有原來兩個或多個動物細胞遺傳信息的單核細胞稱為雜交細胞 C．常用于誘導動物細胞融合的手段有：聚乙二醇、滅活的病毒、電激、紫外線照射 D．細胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能 答案　C 解析　動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞融合成一個細胞的過程，A正確；融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜交細胞，B正確；誘導動物細胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，不能用紫外線照射，C錯誤；細胞融合技術(shù)突破了有性雜交不親和的障礙，使遠緣雜交成為可能，D正確。 2．動物細胞融合的目的中最重要的是(　　) A．克服遠緣雜交不親和 B．制備單克隆抗體 C．培育新物種 D．生產(chǎn)雜交細胞 答案　B 解析　動物細胞融合不像植物體細胞雜交那樣主要是為了克服遠緣雜交不親和的障礙，以培育新品種。另外，植物體細胞雜交還應用了植物體細胞的全能性，動物細胞作為整體，它的全能性受到限制，目前只見到高度分化的細胞核在去核卵細胞中表現(xiàn)出全能性，還未見到融合細胞核表現(xiàn)出全能性的例子，因此動物細胞融合不能用來培育新物種。生產(chǎn)雜交細胞，不是細胞融合的主要目的，雜交細胞只是細胞融合完成后所形成的結(jié)構(gòu)名稱。 3．單克隆抗體與血清抗體相比，其優(yōu)越之處在于(　　) A．單克隆抗體可作為某些藥物的載體 B．單克隆抗體可以在體外制備 C．單克隆抗體特異性強、靈敏度高，并可大量制備 D．單克隆抗體的制備過程簡單，操作方便 答案　C 解析　普通的抗體其實也可作為藥物的載體，并可在體外通過細胞培養(yǎng)制備，但因其純度低、特異性差，在“生物導彈”應用上沒有價值。單克隆抗體的制備過程比普通抗體的制備過程要復雜得多。 4．“生物導彈”是指(　　) A．單克隆抗體 B．雜交瘤細胞 C．產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞 D．在單克隆抗體上連接抗癌藥物 答案　D 解析　把抗癌細胞的單克隆抗體跟放射性同位素、化學藥物或細胞毒素相結(jié)合，制成“生物導彈”，注入體內(nèi)，借助單克隆抗體的導向作用，能將藥物定向帶到癌細胞所在位置，在原位殺死癌細胞。 5．科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交瘤細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體。與骨髓瘤細胞融合的細胞是(　　) A．經(jīng)過特定抗原免疫的B淋巴細胞 B．不經(jīng)過免疫的B淋巴細胞 C．經(jīng)過特定抗原免疫的T淋巴細胞 D．不經(jīng)過免疫的T淋巴細胞 答案　A 解析　骨髓瘤細胞必須與經(jīng)過特定抗原免疫的B淋巴細胞融合，形成雜交瘤細胞，才能大量增殖并產(chǎn)生能夠與相應的抗原特異性結(jié)合的單克隆抗體。 6．制備單克隆抗體所采用的細胞工程技術(shù)包括(　　) ①細胞培養(yǎng)?、诩毎诤稀、叟咛ヒ浦病、芗毎艘浦? A．①② B．①③ C．②③ D．③④ 答案　A 解析　制備單克隆抗體時，首先采用細胞融合技術(shù)得到雜交瘤細胞，再采用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)獲得能產(chǎn)生所需抗體的細胞群。 7．下面是單克隆抗體制備過程示意圖，其中1過程注射的物質(zhì)和A細胞的名稱分別為(　　) A．抗體、T淋巴細胞 B．抗原、T淋巴細胞 C．抗體、B淋巴細胞 D．抗原、B淋巴細胞 答案　D 解析　單克隆抗體是由骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合而成的雜交瘤細胞產(chǎn)生的，其中B淋巴細胞必須首先經(jīng)過抗原刺激后才能成為具有分泌抗體功能的細胞。 鞏固提升 8．科學家用滅活的病毒把骨髓瘤細胞與經(jīng)過免疫的B淋巴細胞融合得到雜交瘤細胞，滅活病毒的作用是(　　) A．病毒比較小，可鉆入到細胞內(nèi) B．滅活的病毒已完全死亡，死亡的病毒可以讓細胞聚集 C．滅活的病毒已失去感染性，對各種動物細胞不造成破壞，但所保留的融合活性可使不同的動物細胞進行融合 D．滅活的病毒帶有目的基因，通過融合可以讓雜交細胞帶有目的基因 答案　C 解析　動物細胞融合常用滅活的病毒作誘導劑是因為滅活的病毒不再具有感染性，不會對細胞造成破壞，但仍可促使不同的動物細胞融合。 9．單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學研究中具有廣泛的應用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯誤的是(　　) A．特異性強、靈敏度高 B．與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導彈” C．體外培養(yǎng)B淋巴細胞可大量分泌單克隆抗體 D．由經(jīng)過免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞分泌 答案　C 解析　抗體是由B淋巴細胞分泌的，每一種B淋巴細胞只能分泌一種抗體。要想獲得大量單一抗體，需要將某一種B淋巴細胞大量克隆，但是在體外培養(yǎng)的條件下，B淋巴細胞不能無限增殖。由B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞，能在體外培養(yǎng)的條件下大量增殖，并分泌單克隆抗體。 10．20世紀30年代，科學家們發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核、天花、水痘和麻疹等疾病患者的病理組織中存在多核細胞，這些多核細胞最可能的來源是(　　) A．細胞進行了無絲分裂造成的 B．細胞進行有絲分裂時，染色體復制后沒有分開形成兩個子細胞 C．有絲分裂時，細胞核進行了分裂，而細胞質(zhì)沒有進行分裂 D．細胞在體內(nèi)病毒的作用下發(fā)生了細胞融合 答案　D 解析　選項C、D都可形成多核細胞，但結(jié)合題干信息，此種現(xiàn)象與感染病毒有關(guān)，故選項D最有可能。 11．用動物細胞工程技術(shù)制備單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是(　　) A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞 B．用氯化鈣作誘導劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合 C．篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體 D．該雜交瘤細胞株的增殖方式和產(chǎn)物分別是有絲分裂和單克隆抗體 答案　B 解析　B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合需要滅活的病毒、聚乙二醇或物理因素來誘導。氯化鈣不能作為誘導劑，氯化鈣的作用是在基因工程中用于提高細胞壁的通透性，便于重組質(zhì)粒進入微生物細胞內(nèi)。 12．右圖為細胞融合過程示意圖，請據(jù)圖回答下列問題： (1)若A、B是植物細胞，則其融合形成的D細胞培養(yǎng)成植株，還要應用________________________________________________________________________技術(shù)。 (2)若A、B是動物細胞，則一般取自________、幼齡動物的器官或組織，然后用胰蛋白酶使其分散開來。A、B到C的過程中，常用的不同于植物細胞工程的方法是用________________誘導細胞融合。 (3)若該過程用于制備干擾素，A為小鼠________細胞，在獲得此細胞之前，應給小鼠注射相應的抗原，此時的B為________細胞。 (4)從A、B到C的過程中，可形成________種類型的C細胞(僅考慮兩個細胞間的融合)。若該過程用于制備單克隆抗體，應篩選出符合要求的D細胞，方法是用特定的________________________培養(yǎng)基培養(yǎng)，篩選出的D細胞稱為____________________________________________，常用的培養(yǎng)方法有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種；前者是在________培養(yǎng)基中培養(yǎng)，后者是在________________內(nèi)增殖。 答案　(1)植物組織培養(yǎng)　(2)胚胎　滅活的(仙臺)病毒　(3)效應T　骨髓瘤　(4)3　選擇　雜交瘤細胞　液體　動物的腹腔 解析　若A、B是植物細胞，則D代表雜種植株，若A、B是動物細胞，進行細胞培養(yǎng)時首先要用胰蛋白酶將器官、組織塊分散成單個細胞，選用的材料一般為胚胎、幼齡動物的器官或組織，因為這些部位的細胞代謝旺盛，細胞分裂能力強；如欲通過雜交細胞產(chǎn)生干擾素，類比“單克隆抗體的制備”方法，應融合效應T細胞和骨髓瘤細胞；能夠產(chǎn)生單克隆抗體的是雜交瘤細胞，需用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選，經(jīng)抗體專一檢測后大量克隆，以便進行體內(nèi)或體外的單抗生產(chǎn)。 13．下圖表示單克隆抗體制備過程的各階段圖解，請據(jù)圖回答下列問題： (1)請用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的順序連接起來。 (2)在單克隆抗體制備過程中選用B淋巴細胞和骨髓瘤細胞，是因為它們?nèi)诤虾蟮碾s交瘤細胞具有____________________、____________________的特性。 (3)由圖中可以看出，在單克隆抗體制備過程中運用了________和________的動物細胞工程技術(shù)手段。 答案　(1)　(2)可在體外大量繁殖　產(chǎn)生特異性抗體　(3)動物細胞融合　動物細胞培養(yǎng) 走進高考 14．(xx新課標卷Ⅰ，40)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如下圖所示。 若要制備雜交瘤細胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細胞(染色體數(shù)目為40條)，并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導細胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞。 回答下列問題： (1)制備融合所需的B淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16 000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過________次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細胞的是________小鼠，理由是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)細胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可能還有__________________________________________________，體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 (3)雜交瘤細胞中有________個細胞核，染色體數(shù)目最多是________條。 (4)未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是________________________________________________________________________。 答案　(1)4　Y　Y小鼠的血清抗體效價最高 (2)B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞　細胞融合是隨機的，且融合率達不到100% (3)1　100 (4)不能無限增殖 解析　(1)據(jù)圖分析可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價幾乎都達到16 000以上，小鼠Y的血清抗體效價最高，最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細胞和雜交瘤細胞之外，還有骨髓瘤細胞的自身融合細胞和B淋巴細胞的自身融合細胞。細胞的融合是隨機的，并且不可能所有細胞都融合，故體系中會出現(xiàn)多種類型的細胞。(3)動物細胞融合后形成的是具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞。雜交瘤細胞的細胞核中的染色體數(shù)目最多為40＋60＝100(條)。(4)正常細胞的分裂次數(shù)是有限的，且經(jīng)過免疫的B淋巴細胞高度分化，不能無限增殖，而是經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后逐漸衰老死亡。