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2019-2020年高中生物 隨堂達標(biāo)檢測 5.2 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增DNA片段（含解析）新人教版選修1 1．下列關(guān)于PCR的描述中，正確的是 (　　)。 ①PCR是一種酶促反應(yīng)?、谝餂Q定了擴增的特異性 ③擴增DNA利用了熱變性的原理　④擴增的對象是氨基酸序列 A．①②④ B．②③④ C．①③④ D．①②③ 解析　PCR是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù)，在高溫條件下，把DNA的雙鏈打開，緩慢冷卻后，又重新結(jié)合，需要耐高溫DNA聚合酶，同時，還需要引物，從引物的3′端連接脫氧核苷酸。 答案　D 2．下列關(guān)于DNA聚合酶催化合成DNA子鏈的說法中，正確的是 (　　)。 A．以DNA為模板，使DNA子鏈從5′端延伸到3′端的一種酶 B．Taq DNA聚合酶必須在每次高溫變性處理后再添加 C．DNA聚合酶能特異性地復(fù)制整個DNA的全部序列 D．Taq DNA聚合酶是從深海生態(tài)系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的 解析　本題主要考查了DNA聚合酶在PCR技術(shù)中的作用及特點。DNA聚合酶不能從頭開始催化合成DNA，而只能從DNA單鏈的3′端延伸子鏈；Taq DNA聚合酶能耐高溫，所以在反應(yīng)體系中可反復(fù)利用，無需另外再添加；PCR擴增的是引物之間的固定長度的DNA序列；Tap DNA聚合酶是1966年從美國黃石公園的一個熱泉某種菌體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的。 答案　A 3．下圖所示為PCR擴增的產(chǎn)物，請分析此產(chǎn)物是哪次循環(huán)的產(chǎn)物 (　　)。 A．第一次循環(huán) B．第二次循環(huán) C．第三次循環(huán) D．第四次循環(huán) 解析　本題考查PCR的過程。在PCR反應(yīng)中，以引物為標(biāo)記，第一次循環(huán)時，以加入的DNA為模板，兩條DNA鏈可分別由引物Ⅰ和引物Ⅱ與其結(jié)合并在DNA聚合酶的作用下延伸，所以形成的每個DNA中只有一種引物；從第二次循環(huán)開始，上次產(chǎn)生的DNA分子又可作為模板參與反應(yīng)，所以會形成DNA分子兩端均含引物的情況，如下圖所示，因此題干中所出現(xiàn)的情況是第一次循環(huán)的產(chǎn)物。 答案　A 4．多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù)。請回答下列問題。 (1)DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械模ǔ_______的末端稱為5′端，當(dāng)引物與DNA母鏈通過堿基互補配對結(jié)合后，DNA聚合酶就能從引物的________開始延伸DNA鏈。 (2)PCR利用了DNA的熱變性原理解決了打開DNA雙鏈的問題，但又導(dǎo)致了DNA聚合酶失活的新問題。到20世紀(jì)80年代，科學(xué)家從一種Taq細(xì)菌中分離到________，它的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用解決了上述問題。要將Taq細(xì)菌從其他普通的微生物中分離出來，所用的培養(yǎng)基叫________。 (3)PCR的每次循環(huán)可以分為________三步。假設(shè)在PCR反應(yīng)中，只有一個DNA片段作為模板，請計算在5次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有________個這樣的DNA片段。 (4)簡述PCR技術(shù)的主要應(yīng)用：___________________(要求至少答兩項)。 答案　(1)磷酸基團　3′端　(2)耐高溫的Taq DNA聚合酶　選擇培養(yǎng)基　(3)變性、復(fù)性和延伸　32　(4)遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和DNA序列測定等 課堂小結(jié)