啟東市高中生物專(zhuān)題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段練習(xí)（打包6套）新人教版.zip,啟東市,高中生物,專(zhuān)題,DNA,蛋白質(zhì),技術(shù),課題,多聚酶,鏈?zhǔn)椒磻?yīng),擴(kuò)增,片段,練習(xí),打包,新人 基礎(chǔ)知識(shí)：PCR的反應(yīng)過(guò)程 1． 在PCR反應(yīng)中，只有一個(gè)DNA的片段作為模板，經(jīng)過(guò)一次循環(huán)后，含引物Ⅰ的DNA單鏈占DNA總鏈數(shù)的(　　) A．1/2 B.1/4 C.1 D.1/8 2． 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?，通常? 的末端稱為5，端，當(dāng)引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后，DNA聚合酶就能從引物的 開(kāi)始延伸DNA鏈。 (2)PCR利用了DNA的熱變性原理解決了打開(kāi)DNA雙鏈的問(wèn)題，但又導(dǎo)致了DNA聚合酶失活的新問(wèn)題。到20世紀(jì)80年代，科學(xué)家從一種Taq細(xì)菌中分離到 ，它的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用解決了上述問(wèn)題。要將Taq細(xì)菌從其它普通的微生物中分離出來(lái)。所用的培養(yǎng)基叫 。 (3)PCR的每次循環(huán)可以分為 三步。假設(shè)在PCR反應(yīng)中，只有一個(gè)DNA片段作為模板，請(qǐng)計(jì)算在5次循拜后，反應(yīng)物中大約有 個(gè)這樣的DNA片段。 (4)簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的主要應(yīng)用(要求答2項(xiàng))___________________________________________ _____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 3． 在PCR擴(kuò)增循環(huán)過(guò)程中，下列說(shuō)法正確的是（　?。?A．在每次循環(huán)中，變性所用的時(shí)間是一樣多的 B．在每次循環(huán)中，復(fù)性所用的時(shí)間是一樣多的 C．在每次循環(huán)中，延伸所用的時(shí)間是一樣多的 D．以上說(shuō)法都不正確 4． PCR技術(shù)的操作步驟依次是（　?。?A．高溫變性、中溫延伸、低溫退火 B．高溫變性、低溫退火、中溫延伸 C．中溫延伸、高溫變性、低溫退火 D．中溫延伸、低溫退火、高溫變性 5． 分離血紅蛋白溶液時(shí)，離心后試管的溶液分四層，血紅蛋白在第(　　)層。 A．一 B．二 C．三 D．四 6． 在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是(　　) A．防止血紅蛋白被氧化 B．血紅蛋白是一種兩性物質(zhì)，需要酸中和 C．磷酸緩沖液會(huì)加速血紅蛋白的提取過(guò)程 D．讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi)，維持其結(jié)構(gòu)和功能 7． 在PCR的實(shí)驗(yàn)操作中,下列說(shuō)法正確的是(　　) ①PCR所用的緩沖液和酶要在常溫下儲(chǔ)存 ②離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán) ③用手指輕彈離心管壁 ④離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部 A．①②③ B.①②④ C.②③④ D.①③④ 8． PCR過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過(guò)程相比,主要有兩點(diǎn)不同,它們是(　　) ①PCR過(guò)程需要的引物是人工合成的單鏈DNA或RNA ②PCR過(guò)程不需要DNA聚合酶 ③PCR過(guò)程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通過(guò)對(duì)反應(yīng)溫度的控制來(lái)實(shí)現(xiàn)的 ④PCR過(guò)程中,DNA不需要解旋,直接以雙鏈DNA為模板進(jìn)行復(fù)制 A．③④ B.①② C.①③ D.②④ 9． PCR技術(shù)的操作步驟依次是（ ） A．高溫變性、中溫延伸、低溫復(fù)性 B. 高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延伸 C．中溫延伸、高溫變性、低溫復(fù)性 D. 中溫延伸、低溫復(fù)性、高溫變性 10． 關(guān)于DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的有關(guān)說(shuō)法正確的是（ ） ??????????? 充分溶解DNA的鹽溶液是0.14mol/L的NaCl溶液 ??????????? 實(shí)驗(yàn)中提取較純凈的DNA利用了DNA不溶于酒精的特點(diǎn) ??????????? 對(duì)最后提取出DNA用二苯胺試劑鑒定時(shí)需用酒精燈直接加熱 ??????????? 實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中先后兩次加入蒸餾水的作用相同 參考答案： 1． 答案： B 解析： 經(jīng)過(guò)一次循環(huán)后，DNA單鏈共4條，含引物Ⅰ的DNA單鏈只有1條。 2． 答案： ⑴磷酸基團(tuán) 3‘端 ⑵耐高溫的TaqDNA聚合酶 選擇培養(yǎng)基 ⑶變性、復(fù)性和延伸 32 ⑷遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和DNA序列測(cè)定等（要求答2項(xiàng)） 解析： 本題考查PCR技術(shù)有關(guān)知識(shí)。DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械模ǔ⒑杏坞x的磷酸基團(tuán)的末端稱為5，端，而DNA聚合酶從引物的3‘開(kāi)始延伸DNA鏈；在體外擴(kuò)增DNA時(shí)不用解旋酶而是用熱變性處理的方法打開(kāi)DNA雙鏈，因此需要使用耐高溫的DNA聚合酶；PCR的每次循環(huán)可以分為變性、復(fù)性和延伸三個(gè)步驟，五次循環(huán)后得到25個(gè)DNA片段。PCR技術(shù)有廣泛的應(yīng)用，可以用于遺傳疾病的診斷、刑偵破案、克隆基因等方面。 3． 答案： D 解析： ? 4． 答案： B 解析： PCR技術(shù)的操作步驟依次是：高溫變性、低溫退火、中溫延伸。 5． 答案： 　C 解析： 　分離血紅蛋白溶液時(shí)，離心后可明顯觀察到試管中液體分四層，從上向下數(shù)依次為：無(wú)色透明的甲苯層，白色薄層固體(脂溶性物質(zhì)的沉淀層)、紅色透明液體(血紅蛋白水溶液)、暗紅色沉淀物(其他雜質(zhì))，故血紅蛋白分布于第三層。 6． 答案： 　D 解析： 　利用磷酸緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)pH環(huán)境，保證血紅蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能，便于分離觀察和研究。 7． 答案： C 解析： PCR所用的緩沖液和酶需裝成小份,并在-20℃儲(chǔ)存;蓋嚴(yán)離心管口的蓋子,防止實(shí)驗(yàn)中外源DNA污染;用手指輕輕彈擊管的側(cè)壁,使反應(yīng)液混合均勻;離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部,提高反應(yīng)效果。 8． 答案： C 解析： PCR過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過(guò)程相比較,主要有兩點(diǎn)不同:(1)PCR過(guò)程需要的引物是人工合成的單鏈DNA或RNA,長(zhǎng)度通常為20~30個(gè)核苷酸。(2)PCR過(guò)程中,DNA解旋不依賴解旋酶,而是通過(guò)對(duì)反應(yīng)溫度的控制來(lái)實(shí)現(xiàn)的 9． 答案： B 10． 答案： B 3