啟東市高中生物專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段練習(xí)（打包6套）新人教版.zip,啟東市,高中生物,專題,DNA,蛋白質(zhì),技術(shù),課題,多聚酶,鏈?zhǔn)椒磻?yīng),擴(kuò)增,片段,練習(xí),打包,新人 基礎(chǔ)知識(shí)：PCR原理 1． DNA合成方向是（　?。?A．從子鏈的3′端向5′端延伸 B．從引物的5′端開始延伸 C．從子鏈的5′端向3′端延伸 D．以上皆可 2． 下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是 ( ) A．利用DNA溶于酒精，而蛋白質(zhì)不溶于酒精，可將DNA與蛋白質(zhì)分離 B．利用高溫能使蛋白質(zhì)變性，卻對(duì)DNA沒有影響的特性，可將DNA與蛋白質(zhì)分離 C．在溶有DNA的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水，輕輕攪拌后過濾，取濾液進(jìn)行以后的實(shí)驗(yàn) D．在DNA濾液中加入嫩肉粉，通過木瓜蛋白酶的作用，可將DNA與蛋白質(zhì)分離 3． 酵母菌是一種真菌，與人們的日常生活密切相關(guān)，也是現(xiàn)代生物技術(shù)研究中常用的模式生物。果酒、面包的制作需要酵母菌，酵母菌可以用液體培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)來培養(yǎng)，培養(yǎng)液中酵母菌種群的增長情況與發(fā)酵食品的制作有密切關(guān)系。 (1)土壤中富含各種微生物，將土壤浸出液接種到特定培養(yǎng)基上，可得到酵母菌。這一過程叫做________；為提高果酒的品質(zhì)，發(fā)酵時(shí)常采用人工培養(yǎng)的純凈菌種。實(shí)驗(yàn)室中獲取純凈菌種的方法有________。 (2)果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用________來檢驗(yàn)，在酸性條件下，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈________色。 (3)突變菌往往帶有一些特殊的基因。在獲得這些基因的過程中，PCR技術(shù)相當(dāng)重要。PCR擴(kuò)增反應(yīng)中加入引物的作用是___________________________________________ __加入DNA聚合酶的作用是__________________________________________________。 (4)酵母細(xì)胞固定化可大大提高生產(chǎn)效率。固定酵母細(xì)胞時(shí)首先需要將干酵母放入 ________中活化，若制得的凝膠珠顏色過淺，可能是因?yàn)開__________________________ _________________________________________________________________________。 4． 有關(guān)PCR的描述下列哪項(xiàng)不確切（　　） A．PCR是pilymerase chain rdaction三個(gè)單詞的首字母縮寫 B．1993年，美國生物化學(xué)家穆里斯因發(fā)明PCR技術(shù)而獲得度．諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng) C．PCR技術(shù)的突出優(yōu)點(diǎn)是快速、高效、靈活和易于操作 D．PCR實(shí)驗(yàn)的原理十分復(fù)雜，操作也十分復(fù)雜 5． DNA的復(fù)制需要引物，主要原因是（　?。?A．可加快DNA的復(fù)制速度 B．引物可與DNA母鏈通過堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合 C．引物的5′端有助于DNA聚合酶的延伸DNA鏈 D．DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈 6． PCR技術(shù)中，如何設(shè)計(jì)引物（　?。?A．PCR引物要根據(jù)需要擴(kuò)增的目標(biāo)DNA的堿基序列來設(shè)計(jì) B．PCR引物要根據(jù)已知的DNA序列對(duì)應(yīng)的RNA序列來設(shè)計(jì) C．PCR引物要根據(jù)已知的DNA序列對(duì)應(yīng)的tRNA的序列來設(shè)計(jì) D．以上都不是正確方法 7． 變性作用是指核酸雙螺旋結(jié)構(gòu)被破壞，雙鏈解開，但共價(jià)鍵并未斷裂。引起變性的因素很多，升高溫度、過酸、過堿以及加入變性劑等都能造成核酸變性。PCR的反應(yīng)過程中，引起變性的因素是（　?。?A．pH 過高 B．pH 過低 C．升高溫度 D．加入酒精 8． PCR技術(shù)利用了DNA的什么原理來控制DNA的解旋與結(jié)合(　　) A．特異性 B．穩(wěn)定性 C．熱變性 D．多樣性 9． 下列有關(guān)PCR技術(shù)的敘述不正確的是(　　) A．聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是用DNA聚合酶在體外擴(kuò)增DNA片段的技術(shù) B．在用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，DNA的復(fù)制過程與細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制類似 C．PCR反應(yīng)需在一定的緩沖溶液中進(jìn)行，只需提供：DNA模板以及四種脫氧核苷酸 D．PCR一般經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)分為變性、復(fù)性和延伸 10． 利用PCR技術(shù)可獲得目的基因，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（　?。?A．用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)不必知道基因的全部序列 B．PCR反應(yīng)體系中需添加磷酸、脫氧核糖和含氮的堿基作為原料 C．PCR 體系中需要添加從受體細(xì)胞中提取的解旋酶和DNA聚合酶 D．PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng) 參考答案： 1． 答案： C 解析： DNA聚合酶能從引物的3′端開始延伸DNA鏈，DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸。 2． 答案： D 解析： 利用DNA不溶于酒精，而蛋白質(zhì)溶于酒精，可將DNA和蛋白質(zhì)分開。溫度過高也會(huì)影響DNA的特性，如PCR技術(shù)。在物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的氯化鈉溶液中DNA溶解度最大，但加入蒸餾水后，DNA溶解度降低，DNA析出，過濾后應(yīng)取其黏稠物進(jìn)行以后的實(shí)驗(yàn)。蛋白酶能分解蛋白質(zhì)，而不能分解DNA。 3． 答案： (1)酵母菌的分離　平板劃線法和稀釋涂布平板法 (2)重鉻酸鉀　灰綠　(3)使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸　催化DNA子鏈的合成　(4)蒸餾水 海藻酸鈉濃度過低 解析： 從近幾年的高考看，在有限的題量中，命題往往以一個(gè)中心事例為切入點(diǎn)，綜合考查幾項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用。本題以酵母菌為主線，綜合考查了酵母菌的分離培養(yǎng)、酒精發(fā)酵、PCR技術(shù)、酵母細(xì)胞固定化技術(shù)等內(nèi)容。第(1)小題考查了微生物的分離技術(shù)和接種方法。在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)需要的微生物的生長，目的是從眾多微生物中分離出所需要的微生物。微生物的純化培養(yǎng)(兩種接種方法)是平板劃線法和稀釋涂布平板法。第(2)小題考查發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生的鑒定方法。發(fā)酵后取樣，可通過嗅味和品嘗進(jìn)行初步鑒定，用重鉻酸鉀檢驗(yàn)酒精的存在，其基本原理是酒精可使重鉻酸鉀的濃硫酸溶液顏色由橙色變?yōu)榛揖G色。第(3)小題考查PCR技術(shù)的基礎(chǔ)知識(shí)。PCR技術(shù)中的引物可以是RNA或單鏈DNA分子片段，PCR技術(shù)需要設(shè)計(jì)兩種引物，分別與模板DNA兩條鏈相結(jié)合，使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸。DNA聚合酶催化合成DNA子鏈。第(4)小題，在缺水的狀態(tài)下，微生物會(huì)處于休眠狀態(tài)?；罨褪亲屘幱谛菝郀顟B(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時(shí)間，以便形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。觀察凝膠珠的顏色和形狀：如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明海藻酸鈉的濃度偏低，固定的酵母細(xì)胞數(shù)目較少；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉的濃度偏高，制作失敗，需要再作嘗試。 4． 答案： D 解析： ? 5． 答案： D 解析： DNA聚合酶不能從5′端開始合成DNA，而只能從3′端延伸DNA鏈，因此，DNA復(fù)制需要引物。當(dāng)引物與DNA母鏈通過堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后，DNA聚合酶就能從引物的3′端開始延伸DNA鏈，DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸。 6． 答案： A 解析： DNA復(fù)制需要引物，引物是一小段DNA或RNA，能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)，故引物的設(shè)計(jì)要根據(jù)目標(biāo)DNA的堿基序列來確定。 7． 答案： C 解析： 各選項(xiàng)的條件均能導(dǎo)致DNA分子變性，但在PCR反應(yīng)中，變性后還要進(jìn)行復(fù)性和延伸等過程，過酸、過堿、酒精等會(huì)導(dǎo)致反應(yīng)過程中的酶變性失活，使DNA擴(kuò)增不能進(jìn)行，因此，在PCR反應(yīng)中，選用升高溫度使DNA變性。 8． 答案： C 解析： DNA分子在80～100 ℃的溫度范圍內(nèi)變性，雙鏈解開成單鏈，當(dāng)溫度慢慢降低時(shí)，又能重新結(jié)合形成雙鏈。 9． 答案： C 解析： PCR反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中進(jìn)行，需提供DNA模板，分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物，四種脫氧核苷酸，耐熱的DNA聚合酶，同時(shí)通過控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行 10． 答案： A 解析： A、用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)，只要設(shè)計(jì)出目的基因的引物，接下來即可自動(dòng)進(jìn)行，因此不必知道基因的全部序列，A正確； B．PCR反應(yīng)體系中需添加脫氧核糖核苷酸作為原料，B錯(cuò)誤； C．PCR過程中是通過高溫使氫鍵斷裂的，因此不需要加入解旋酶，C錯(cuò)誤； D．PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了變性、復(fù)性、延伸，而不是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng)，D錯(cuò)誤． 故選：A． 4