啟東市高中生物專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段練習(xí)(打包6套)新人教版.zip
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基礎(chǔ)知識(shí):PCR原理
1. DNA中磷酸基團(tuán)末端稱為( ?。?A.3′端 B.2′端 C.5′端 D.1′端
2. DNA復(fù)制過(guò)程中的前提是( ?。?A.獲得引物 B.催化合成DNA子鏈
C.解旋 D.4種脫氧核苷酸
3. 催化合成DNA子鏈的是( )
A.解旋酶 B.DNA聚合酶
C.引物 D.淀粉酶
4. 下列不屬于PCR技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)的是( ?。?A.簡(jiǎn)單,易于操作
B.可以完全無(wú)限制擴(kuò)增
C.實(shí)用性強(qiáng),靈敏度高
D.快速、高效,并可自動(dòng)化
5. 有關(guān)PCR反應(yīng)的敘述中,正確的是( ?。?A.PCR反應(yīng)所需要的引物只是RNA
B.PCR反應(yīng)所需要的原料是核糖核苷酸
C.PCR反應(yīng)所需要的酶在60 ℃時(shí)會(huì)變性
D.PCR反應(yīng)需要在一定的緩沖液中進(jìn)行
6. 在下列哪種溫度范圍內(nèi),DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)能解開( )
A.10~20 ℃ B.80~100 ℃
C.20~30 ℃ D.40~60 ℃
7. 下列關(guān)于DNA雙鏈的敘述錯(cuò)誤的是( ?。?A.通常將DNA的羥基末端稱為5′端,而磷酸基團(tuán)的末端稱為3′端
B.通常將DNA的羥基末端稱為3′端,而磷酸基團(tuán)的末端稱為5′端
C.通常DNA只能從3′端延伸DNA鏈
D.通常DNA不能從5′端延伸DNA鏈
8. 下列有關(guān)PCR的描述,不正確的是( ?。?A.是一種酶促反應(yīng)
B.引物決定了擴(kuò)增的特異性
C.PCR反應(yīng)中的目的片段一般以2n指數(shù)擴(kuò)增
D.?dāng)U增對(duì)象是氨基酸序列
9. 由李建遠(yuǎn)教授率領(lǐng)的科研團(tuán)隊(duì),在山東煙臺(tái)毓璜頂醫(yī)院成功克隆出5枚符合國(guó)際公認(rèn)技術(shù)鑒定指標(biāo)的人類囊胚.請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)在卵子去核的過(guò)程中,李建元教授采用三維立體偏震光紡錘體成像系統(tǒng),對(duì)核DNA精確定位后,再用微激光主要對(duì)卵子的第一屏障打孔,才能精確剔除卵子細(xì)胞核.這一屏障是指 A.卵黃膜 B.透明帶 C.核膜
(2)在培養(yǎng)皮膚纖維細(xì)胞和淋巴細(xì)胞時(shí),需要用胰蛋白酶等處理,原因是 .培養(yǎng)過(guò)程中除了保證無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境外,為了防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染,通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的 .
(3)通過(guò)克隆胚胎進(jìn)而用其衍生而來(lái)的器官,來(lái)取代患者本人病變的器官,就會(huì)避免免疫排異反應(yīng)的發(fā)生,根本原因是 .
(4)獲得目的基因后可采用 技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增.大部分物種的基因能拼接在一起,是因?yàn)? .檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入植物細(xì)胞,可采用的生物技術(shù)是 .
10. 要使PCR反應(yīng)在體外的條件下順利地進(jìn)行,需要嚴(yán)格的控制( )
A.氧氣的濃度 B.酸堿度 C.溫度 D.大氣的濕度
參考答案:
1. 答案: C
解析: DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,通常將DNA的羥基末端稱為3′端,而磷酸基團(tuán)的末端稱為5′端。
2. 答案: C
解析: 在DNA的復(fù)制過(guò)程中,雙鏈的解開是進(jìn)行DNA復(fù)制的前提。
3. 答案: B
解析: 在DNA復(fù)制過(guò)程中,起催化作用的是DNA聚合酶。
4. 答案: B
解析: PCR技術(shù)要設(shè)計(jì)引物,因此擴(kuò)增具有特異性,靈敏度很高。而應(yīng)用Taq DNA聚合酶的PCR儀可自動(dòng)化,操作簡(jiǎn)單。PCR技術(shù)能在體外迅速擴(kuò)增DNA片段,快速高效,往往被誤認(rèn)為可以無(wú)限制擴(kuò)增,其實(shí)PCR的循環(huán)次數(shù)一般以25~35次循環(huán)為宜,當(dāng)反應(yīng)超過(guò)35次循環(huán)時(shí),PCR產(chǎn)物也不再增加。
5. 答案: D
解析: PCR反應(yīng)所需要的引物是DNA或RNA;原料是四種脫氧核糖核苷酸;變性是在高溫下進(jìn)行的,所用Taq聚合酶的特點(diǎn)是耐高溫,即在高溫下不變性。
6. 答案: B
解析: DNA在80 ℃以上才會(huì)變性,雙螺旋結(jié)構(gòu)能解開。
7. 答案: A
解析: 本題考查DNA雙鏈的結(jié)構(gòu)與復(fù)制。通常將DNA的羥基末端稱為3′端,磷酸基團(tuán)末端稱為5′端。
8. 答案: D
解析: PCR是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù),它以極少量的DNA為模板,以四種脫氧核苷酸為原料,在引物作用下使DNA聚合酶從引物的3′端連接脫氧核苷酸,短時(shí)間內(nèi)迅速?gòu)?fù)制上百萬(wàn)份的DNA拷貝,其擴(kuò)增產(chǎn)量y=a·2n,a代表模板DNA量,y代表DNA片段擴(kuò)增后的理論拷貝數(shù),n代表循環(huán)次數(shù);在擴(kuò)增過(guò)程中,被擴(kuò)增的是DNA序列,而不是氨基酸序列,因此D項(xiàng)錯(cuò)誤。
9. 答案: (1)B
(2)將細(xì)胞分散開來(lái)解除接觸抑制 抗生素
(3)遺傳物質(zhì)相同
(4)PCR 大部分生物的遺傳物質(zhì)都是DNA,且都是雙螺旋結(jié)構(gòu) DNA分子雜交
解析: (1)對(duì)卵子的第一屏障打孔,才能精確剔除卵子細(xì)胞核,而這一屏障是透明帶,故選:B.
(2)在培養(yǎng)皮膚纖維細(xì)胞和淋巴細(xì)胞時(shí),需要用胰蛋白酶等處理,原因是將細(xì)胞分散解除接觸性抑制.培養(yǎng)過(guò)程中通常在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染.
(3)通過(guò)克隆胚胎進(jìn)而用其衍生而來(lái)的器官,來(lái)取代患者本人病變的器官,由于遺傳基因(物質(zhì))完全相同,則避免免疫排異反應(yīng)的發(fā)生.
(4)獲得目的基因后可采用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增;大部分物種的基因能拼接在一起,原因是大部分生物的遺傳物質(zhì)都是DNA而且都是雙螺旋結(jié)構(gòu);采用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入植物細(xì)胞.
10. 答案: C
解析: 要使PCR反應(yīng)在體外的條件下順利地進(jìn)行,需要嚴(yán)格的控制溫度,因?yàn)槊甘軠囟扔绊?
3
基礎(chǔ)知識(shí):PCR的反應(yīng)過(guò)程
1. 在PCR反應(yīng)中,只有一個(gè)DNA的片段作為模板,經(jīng)過(guò)一次循環(huán)后,含引物Ⅰ的DNA單鏈占DNA總鏈數(shù)的( )
A.1/2 B.1/4 C.1 D.1/8
2. 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,通常? 的末端稱為5,端,當(dāng)引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后,DNA聚合酶就能從引物的 開始延伸DNA鏈。
(2)PCR利用了DNA的熱變性原理解決了打開DNA雙鏈的問(wèn)題,但又導(dǎo)致了DNA聚合酶失活的新問(wèn)題。到20世紀(jì)80年代,科學(xué)家從一種Taq細(xì)菌中分離到 ,它的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用解決了上述問(wèn)題。要將Taq細(xì)菌從其它普通的微生物中分離出來(lái)。所用的培養(yǎng)基叫 。
(3)PCR的每次循環(huán)可以分為 三步。假設(shè)在PCR反應(yīng)中,只有一個(gè)DNA片段作為模板,請(qǐng)計(jì)算在5次循拜后,反應(yīng)物中大約有 個(gè)這樣的DNA片段。
(4)簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的主要應(yīng)用(要求答2項(xiàng))___________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
3. 在PCR擴(kuò)增循環(huán)過(guò)程中,下列說(shuō)法正確的是( ?。?A.在每次循環(huán)中,變性所用的時(shí)間是一樣多的
B.在每次循環(huán)中,復(fù)性所用的時(shí)間是一樣多的
C.在每次循環(huán)中,延伸所用的時(shí)間是一樣多的
D.以上說(shuō)法都不正確
4. PCR技術(shù)的操作步驟依次是( ?。?A.高溫變性、中溫延伸、低溫退火
B.高溫變性、低溫退火、中溫延伸
C.中溫延伸、高溫變性、低溫退火
D.中溫延伸、低溫退火、高溫變性
5. 分離血紅蛋白溶液時(shí),離心后試管的溶液分四層,血紅蛋白在第( )層。
A.一 B.二
C.三 D.四
6. 在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是( )
A.防止血紅蛋白被氧化
B.血紅蛋白是一種兩性物質(zhì),需要酸中和
C.磷酸緩沖液會(huì)加速血紅蛋白的提取過(guò)程
D.讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi),維持其結(jié)構(gòu)和功能
7. 在PCR的實(shí)驗(yàn)操作中,下列說(shuō)法正確的是( )
①PCR所用的緩沖液和酶要在常溫下儲(chǔ)存
②離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán)
③用手指輕彈離心管壁
④離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部
A.①②③ B.①②④ C.②③④ D.①③④
8. PCR過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過(guò)程相比,主要有兩點(diǎn)不同,它們是( )
①PCR過(guò)程需要的引物是人工合成的單鏈DNA或RNA
②PCR過(guò)程不需要DNA聚合酶
③PCR過(guò)程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通過(guò)對(duì)反應(yīng)溫度的控制來(lái)實(shí)現(xiàn)的
④PCR過(guò)程中,DNA不需要解旋,直接以雙鏈DNA為模板進(jìn)行復(fù)制
A.③④ B.①② C.①③ D.②④
9. PCR技術(shù)的操作步驟依次是( )
A.高溫變性、中溫延伸、低溫復(fù)性 B. 高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延伸
C.中溫延伸、高溫變性、低溫復(fù)性 D. 中溫延伸、低溫復(fù)性、高溫變性
10. 關(guān)于DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的有關(guān)說(shuō)法正確的是( )
??????????? 充分溶解DNA的鹽溶液是0.14mol/L的NaCl溶液
??????????? 實(shí)驗(yàn)中提取較純凈的DNA利用了DNA不溶于酒精的特點(diǎn)
??????????? 對(duì)最后提取出DNA用二苯胺試劑鑒定時(shí)需用酒精燈直接加熱
??????????? 實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中先后兩次加入蒸餾水的作用相同
參考答案:
1. 答案: B
解析: 經(jīng)過(guò)一次循環(huán)后,DNA單鏈共4條,含引物Ⅰ的DNA單鏈只有1條。
2. 答案: ⑴磷酸基團(tuán) 3‘端 ⑵耐高溫的TaqDNA聚合酶 選擇培養(yǎng)基 ⑶變性、復(fù)性和延伸 32 ⑷遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和DNA序列測(cè)定等(要求答2項(xiàng))
解析: 本題考查PCR技術(shù)有關(guān)知識(shí)。DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,通常將含有游離的磷酸基團(tuán)的末端稱為5,端,而DNA聚合酶從引物的3‘開始延伸DNA鏈;在體外擴(kuò)增DNA時(shí)不用解旋酶而是用熱變性處理的方法打開DNA雙鏈,因此需要使用耐高溫的DNA聚合酶;PCR的每次循環(huán)可以分為變性、復(fù)性和延伸三個(gè)步驟,五次循環(huán)后得到25個(gè)DNA片段。PCR技術(shù)有廣泛的應(yīng)用,可以用于遺傳疾病的診斷、刑偵破案、克隆基因等方面。
3. 答案: D
解析: ?
4. 答案: B
解析: PCR技術(shù)的操作步驟依次是:高溫變性、低溫退火、中溫延伸。
5. 答案: C
解析: 分離血紅蛋白溶液時(shí),離心后可明顯觀察到試管中液體分四層,從上向下數(shù)依次為:無(wú)色透明的甲苯層,白色薄層固體(脂溶性物質(zhì)的沉淀層)、紅色透明液體(血紅蛋白水溶液)、暗紅色沉淀物(其他雜質(zhì)),故血紅蛋白分布于第三層。
6. 答案: D
解析: 利用磷酸緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)pH環(huán)境,保證血紅蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能,便于分離觀察和研究。
7. 答案: C
解析: PCR所用的緩沖液和酶需裝成小份,并在-20℃儲(chǔ)存;蓋嚴(yán)離心管口的蓋子,防止實(shí)驗(yàn)中外源DNA污染;用手指輕輕彈擊管的側(cè)壁,使反應(yīng)液混合均勻;離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部,提高反應(yīng)效果。
8. 答案: C
解析: PCR過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過(guò)程相比較,主要有兩點(diǎn)不同:(1)PCR過(guò)程需要的引物是人工合成的單鏈DNA或RNA,長(zhǎng)度通常為20~30個(gè)核苷酸。(2)PCR過(guò)程中,DNA解旋不依賴解旋酶,而是通過(guò)對(duì)反應(yīng)溫度的控制來(lái)實(shí)現(xiàn)的
9. 答案: B
10. 答案: B
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實(shí)驗(yàn)——多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段
1. 下列有關(guān)PCR技術(shù)的說(shuō)法,錯(cuò)誤的是:
A.DNA復(fù)制所需要的引物的作用是使DNA聚合酶能從3’端延伸DNA鏈
B.引物與DNA母鏈的關(guān)系是堿基互補(bǔ)配對(duì)
C.添加緩沖溶液的作用是維持pH基本不變
D.DNA聚合酶可以用來(lái)合成引物
2. 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)模擬生物體內(nèi)的DNA復(fù)制,需要哪些條件( ?。?
①酶?、谟坞x的脫氧核苷酸?、跘TP?、蹹NA分子 ⑤引物?、辴RNA?、哌m宜的溫度?、噙m宜的酸堿度
A.①②③④⑤⑥ B.②③④⑤⑥⑦
C.②③④⑤⑦⑧ D.①②④⑤⑦⑧
3. 在PCR的實(shí)驗(yàn)操作中,下列說(shuō)法正確的是( ?。?
①在微量離心管中添加各種試劑時(shí),只需要一個(gè)槍頭
②離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán)
③用手指輕彈離心管壁
④離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部
A.①②③ B.①②④
C.②③④ D.①③④
4. 在PCR實(shí)驗(yàn)操作中,下列說(shuō)法不正確的是( ?。?
A.在微量離心管中添加各種試劑時(shí),只需一個(gè)槍頭
B.離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán),防止液體外溢
C.用手輕彈離心管壁的目的是使反應(yīng)液充分混合
D.離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管底部,提高反應(yīng)效果
5. PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA,需要的條件是( ?。?
①目的基因?、谝铩、鬯姆N脫氧核苷酸?、蹹NA聚合酶等 ⑤mRNA?、藓颂求w
A.②③④⑤ B.①②③⑥
C.①②③④ D.①③④⑤
6. 下列對(duì)操作過(guò)程的敘述,錯(cuò)誤的是( ?。?
A.PCR反應(yīng)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌
B.PCR所用的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份,并在-20 ℃儲(chǔ)存
C.PCR所用的緩沖液和酶從冰箱拿出之后,迅速融化
D.在微量離心管中添加反應(yīng)成分時(shí),每吸取一種試劑后,移液器上的吸液槍頭都必須更換
7. PCR技術(shù)是在遺傳實(shí)驗(yàn)室中常見的一種DNA片段進(jìn)行體外擴(kuò)增的方法,利用它能快速得到大量的目的基因或DNA分子片段。在PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是( )
A.反復(fù)洗滌 B.不被外源DNA污染
C.高壓滅菌 D.在-20℃保存
8. 回答下列關(guān)于DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的相關(guān)問(wèn)題:
(1)PCR與生物體內(nèi)的DNA復(fù)制有何區(qū)別?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)PCR每次循環(huán)都可分為________、________和______三步。
(3)_____ ___的發(fā)現(xiàn)和使用大大提高了PCR的效率,使PCR技術(shù)趨向________。
(4)PCR通過(guò)控制________來(lái)控制雙鏈的________與________。
(5)PCR反應(yīng)需要一定的緩沖溶液中提供________、分別與兩條模板結(jié)合的__________、__________種脫氧核苷酸、________的DNA聚合酶。
(6)從第二輪循環(huán)開始,DNA聚合酶只能特異的復(fù)制________的DNA序列,使這段________的序列呈指數(shù)擴(kuò)增。
9. 使用PCR儀具體實(shí)驗(yàn)操作順序應(yīng)為( ?。?
①設(shè)計(jì)好PCR儀的循環(huán)程序?、诎磁浞綔?zhǔn)備好各組分?、塾梦⒘恳埔浩髟谖⒘侩x心管中依次加入各組分 ④進(jìn)行PCR反應(yīng)?、蓦x心使反應(yīng)液集中在離心管底部
A.②③⑤④① B.①⑤③②④
C.②③⑤①④ D.④②⑤③①
10. PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、吸頭、緩沖液以及蒸餾水使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是( )
A.反復(fù)洗滌 B.外源DNA污染
C.高壓蒸汽滅菌 D.在-20 ℃儲(chǔ)存
參考答案:
1. 答案: D
解析: ?
2. 答案: D
解析: 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)模擬DNA復(fù)制時(shí),需要DNA聚合酶催化合成DNA子鏈;四種脫氧核苷酸為合成子鏈的原料;DNA母鏈為DNA復(fù)制的模板;還需要引物、較高的溫度、適宜的酸堿度等。
3. 答案: C
解析: 在微量離心管中添加反應(yīng)成分時(shí),每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭都必須更換,以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性;蓋嚴(yán)離心管口的蓋子,防止實(shí)驗(yàn)中外源DNA污染;用手指輕輕彈擊管的側(cè)壁,使反應(yīng)液混合均勻;離心目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部,提高反應(yīng)效果。
4. 答案: A
解析: 在微量離心管中添加各種試劑時(shí),每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭必須更換,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性;離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán),防止實(shí)驗(yàn)中脫落或液體外溢;離心10 s的目的是使反應(yīng)液集中在離心管底部,提高反應(yīng)效果。
5. 答案: C
解析: PCR技術(shù)需要目的基因作為擴(kuò)增的模板,DNA聚合酶催化反應(yīng)的進(jìn)行,而引物是滿足DNA聚合酶起作用的需要,四種脫氧核苷酸是該過(guò)程的原料。
6. 答案: C
解析: 為了防止外源DNA等因素的污染,PCR反應(yīng)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌;所用的緩沖液及酶應(yīng)分裝成小份保存,并使用一次性吸液槍頭,即A、B、D均正確。在冰箱中放置的緩沖液和酶取出后應(yīng)放在冰塊上緩慢融化,而不能迅速融化,故C錯(cuò)誤。
7. 答案: C
解析: 通過(guò)對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)中所用儀器和試劑進(jìn)行高壓滅菌,可以避免外源DNA等因素的污染。
8. 答案: (1)①PCR反應(yīng)不需要解旋酶,而生物體內(nèi)DNA復(fù)制時(shí)需要解旋酶;
②PCR需要耐熱的DNA聚合酶,而生物體內(nèi)DNA聚合酶在高溫的時(shí)候會(huì)變性;
③PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán),而生物體內(nèi)DNA復(fù)制需要生物體自身的控制
(2)變性 退火 延伸
(3)Taq聚合酶 自動(dòng)化
(4)溫度 解聚 結(jié)合
(5)DNA模板 兩種引物 四 耐熱
(6)處于兩個(gè)引物之間 固定長(zhǎng)度
解析: 本題主要考查關(guān)于DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的知識(shí),尤其對(duì)PCR技術(shù)的考查較細(xì)致,可參考。
9. 答案: C
解析: PCR反應(yīng)的操作步驟一般分為準(zhǔn)備(包括配置配方及將各配方放于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上)→移液→混合→離心→反應(yīng),因PCR儀是一種自動(dòng)控制溫度的儀器,設(shè)計(jì)好循環(huán)程序就可以進(jìn)行反應(yīng)了。
10. 答案: C.
解析: 通過(guò)對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)中所用儀器和試劑進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,可以避免外源DNA等因素的污染.
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基礎(chǔ)知識(shí):PCR原理
1. DNA合成方向是( ?。?A.從子鏈的3′端向5′端延伸
B.從引物的5′端開始延伸
C.從子鏈的5′端向3′端延伸
D.以上皆可
2. 下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是 ( )
A.利用DNA溶于酒精,而蛋白質(zhì)不溶于酒精,可將DNA與蛋白質(zhì)分離
B.利用高溫能使蛋白質(zhì)變性,卻對(duì)DNA沒有影響的特性,可將DNA與蛋白質(zhì)分離
C.在溶有DNA的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水,輕輕攪拌后過(guò)濾,取濾液進(jìn)行以后的實(shí)驗(yàn)
D.在DNA濾液中加入嫩肉粉,通過(guò)木瓜蛋白酶的作用,可將DNA與蛋白質(zhì)分離
3. 酵母菌是一種真菌,與人們的日常生活密切相關(guān),也是現(xiàn)代生物技術(shù)研究中常用的模式生物。果酒、面包的制作需要酵母菌,酵母菌可以用液體培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)來(lái)培養(yǎng),培養(yǎng)液中酵母菌種群的增長(zhǎng)情況與發(fā)酵食品的制作有密切關(guān)系。
(1)土壤中富含各種微生物,將土壤浸出液接種到特定培養(yǎng)基上,可得到酵母菌。這一過(guò)程叫做________;為提高果酒的品質(zhì),發(fā)酵時(shí)常采用人工培養(yǎng)的純凈菌種。實(shí)驗(yàn)室中獲取純凈菌種的方法有________。
(2)果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生,可以用________來(lái)檢驗(yàn),在酸性條件下,該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈________色。
(3)突變菌往往帶有一些特殊的基因。在獲得這些基因的過(guò)程中,PCR技術(shù)相當(dāng)重要。PCR擴(kuò)增反應(yīng)中加入引物的作用是___________________________________________ __加入DNA聚合酶的作用是__________________________________________________。
(4)酵母細(xì)胞固定化可大大提高生產(chǎn)效率。固定酵母細(xì)胞時(shí)首先需要將干酵母放入
________中活化,若制得的凝膠珠顏色過(guò)淺,可能是因?yàn)開__________________________
_________________________________________________________________________。
4. 有關(guān)PCR的描述下列哪項(xiàng)不確切( ?。?A.PCR是pilymerase chain rdaction三個(gè)單詞的首字母縮寫
B.1993年,美國(guó)生物化學(xué)家穆里斯因發(fā)明PCR技術(shù)而獲得度.諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)
C.PCR技術(shù)的突出優(yōu)點(diǎn)是快速、高效、靈活和易于操作
D.PCR實(shí)驗(yàn)的原理十分復(fù)雜,操作也十分復(fù)雜
5. DNA的復(fù)制需要引物,主要原因是( ?。?A.可加快DNA的復(fù)制速度
B.引物可與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合
C.引物的5′端有助于DNA聚合酶的延伸DNA鏈
D.DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈
6. PCR技術(shù)中,如何設(shè)計(jì)引物( ?。?A.PCR引物要根據(jù)需要擴(kuò)增的目標(biāo)DNA的堿基序列來(lái)設(shè)計(jì)
B.PCR引物要根據(jù)已知的DNA序列對(duì)應(yīng)的RNA序列來(lái)設(shè)計(jì)
C.PCR引物要根據(jù)已知的DNA序列對(duì)應(yīng)的tRNA的序列來(lái)設(shè)計(jì)
D.以上都不是正確方法
7. 變性作用是指核酸雙螺旋結(jié)構(gòu)被破壞,雙鏈解開,但共價(jià)鍵并未斷裂。引起變性的因素很多,升高溫度、過(guò)酸、過(guò)堿以及加入變性劑等都能造成核酸變性。PCR的反應(yīng)過(guò)程中,引起變性的因素是( ?。?A.pH 過(guò)高 B.pH 過(guò)低
C.升高溫度 D.加入酒精
8. PCR技術(shù)利用了DNA的什么原理來(lái)控制DNA的解旋與結(jié)合( )
A.特異性 B.穩(wěn)定性
C.熱變性 D.多樣性
9. 下列有關(guān)PCR技術(shù)的敘述不正確的是( )
A.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是用DNA聚合酶在體外擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)
B.在用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí),DNA的復(fù)制過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制類似
C.PCR反應(yīng)需在一定的緩沖溶液中進(jìn)行,只需提供:DNA模板以及四種脫氧核苷酸
D.PCR一般經(jīng)歷三十多次循環(huán),每次循環(huán)分為變性、復(fù)性和延伸
10. 利用PCR技術(shù)可獲得目的基因,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( ?。?A.用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)不必知道基因的全部序列
B.PCR反應(yīng)體系中需添加磷酸、脫氧核糖和含氮的堿基作為原料
C.PCR 體系中需要添加從受體細(xì)胞中提取的解旋酶和DNA聚合酶
D.PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng)
參考答案:
1. 答案: C
解析: DNA聚合酶能從引物的3′端開始延伸DNA鏈,DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸。
2. 答案: D
解析: 利用DNA不溶于酒精,而蛋白質(zhì)溶于酒精,可將DNA和蛋白質(zhì)分開。溫度過(guò)高也會(huì)影響DNA的特性,如PCR技術(shù)。在物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的氯化鈉溶液中DNA溶解度最大,但加入蒸餾水后,DNA溶解度降低,DNA析出,過(guò)濾后應(yīng)取其黏稠物進(jìn)行以后的實(shí)驗(yàn)。蛋白酶能分解蛋白質(zhì),而不能分解DNA。
3. 答案: (1)酵母菌的分離 平板劃線法和稀釋涂布平板法 (2)重鉻酸鉀 灰綠 (3)使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸 催化DNA子鏈的合成 (4)蒸餾水 海藻酸鈉濃度過(guò)低
解析: 從近幾年的高考看,在有限的題量中,命題往往以一個(gè)中心事例為切入點(diǎn),綜合考查幾項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用。本題以酵母菌為主線,綜合考查了酵母菌的分離培養(yǎng)、酒精發(fā)酵、PCR技術(shù)、酵母細(xì)胞固定化技術(shù)等內(nèi)容。第(1)小題考查了微生物的分離技術(shù)和接種方法。在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng),促進(jìn)需要的微生物的生長(zhǎng),目的是從眾多微生物中分離出所需要的微生物。微生物的純化培養(yǎng)(兩種接種方法)是平板劃線法和稀釋涂布平板法。第(2)小題考查發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生的鑒定方法。發(fā)酵后取樣,可通過(guò)嗅味和品嘗進(jìn)行初步鑒定,用重鉻酸鉀檢驗(yàn)酒精的存在,其基本原理是酒精可使重鉻酸鉀的濃硫酸溶液顏色由橙色變?yōu)榛揖G色。第(3)小題考查PCR技術(shù)的基礎(chǔ)知識(shí)。PCR技術(shù)中的引物可以是RNA或單鏈DNA分子片段,PCR技術(shù)需要設(shè)計(jì)兩種引物,分別與模板DNA兩條鏈相結(jié)合,使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸。DNA聚合酶催化合成DNA子鏈。第(4)小題,在缺水的狀態(tài)下,微生物會(huì)處于休眠狀態(tài)?;罨褪亲屘幱谛菝郀顟B(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時(shí)間,以便形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。觀察凝膠珠的顏色和形狀:如果制作的凝膠珠顏色過(guò)淺、呈白色,說(shuō)明海藻酸鈉的濃度偏低,固定的酵母細(xì)胞數(shù)目較少;如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,則說(shuō)明海藻酸鈉的濃度偏高,制作失敗,需要再作嘗試。
4. 答案: D
解析: ?
5. 答案: D
解析: DNA聚合酶不能從5′端開始合成DNA,而只能從3′端延伸DNA鏈,因此,DNA復(fù)制需要引物。當(dāng)引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后,DNA聚合酶就能從引物的3′端開始延伸DNA鏈,DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸。
6. 答案: A
解析: DNA復(fù)制需要引物,引物是一小段DNA或RNA,能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì),故引物的設(shè)計(jì)要根據(jù)目標(biāo)DNA的堿基序列來(lái)確定。
7. 答案: C
解析: 各選項(xiàng)的條件均能導(dǎo)致DNA分子變性,但在PCR反應(yīng)中,變性后還要進(jìn)行復(fù)性和延伸等過(guò)程,過(guò)酸、過(guò)堿、酒精等會(huì)導(dǎo)致反應(yīng)過(guò)程中的酶變性失活,使DNA擴(kuò)增不能進(jìn)行,因此,在PCR反應(yīng)中,選用升高溫度使DNA變性。
8. 答案: C
解析: DNA分子在80~100 ℃的溫度范圍內(nèi)變性,雙鏈解開成單鏈,當(dāng)溫度慢慢降低時(shí),又能重新結(jié)合形成雙鏈。
9. 答案: C
解析: PCR反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中進(jìn)行,需提供DNA模板,分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物,四種脫氧核苷酸,耐熱的DNA聚合酶,同時(shí)通過(guò)控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行
10. 答案: A
解析: A、用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí),只要設(shè)計(jì)出目的基因的引物,接下來(lái)即可自動(dòng)進(jìn)行,因此不必知道基因的全部序列,A正確;
B.PCR反應(yīng)體系中需添加脫氧核糖核苷酸作為原料,B錯(cuò)誤;
C.PCR過(guò)程中是通過(guò)高溫使氫鍵斷裂的,因此不需要加入解旋酶,C錯(cuò)誤;
D.PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了變性、復(fù)性、延伸,而不是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng),D錯(cuò)誤.
故選:A.
4
基礎(chǔ)知識(shí):PCR的反應(yīng)過(guò)程
1. 下列對(duì)PCR過(guò)程中“溫度的控制”的敘述中不正確的是( ?。?A.PCR反應(yīng)需要高溫,是為了確保模板是單鏈
B.延伸的溫度必須大于復(fù)性溫度,而小于變性溫度
C.要用耐高溫的DNA聚合酶
D.需要耐高溫的解旋酶
2. 洗滌紅細(xì)胞時(shí),離心所采用的方法是( )
A.低速長(zhǎng)時(shí)間離心 B.低速短時(shí)間離心
C.高速長(zhǎng)時(shí)間離心 D.高速短時(shí)間離心
3. 下列各項(xiàng)中,一般不影響凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中的分離度的是( )
A.層析柱高 B.層析柱的直徑
C.緩沖溶液 D.樣品的分布
4. 聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過(guò)程一般經(jīng)歷下述三十多次循環(huán):95 ℃下使模板DNA變性、解鏈→55 ℃下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)→72 ℃下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關(guān)PCR過(guò)程的敘述中不正確的是( )
A.變性過(guò)程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對(duì)之間的氫鍵,也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn)
B.復(fù)性過(guò)程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合依靠互補(bǔ)配對(duì)原則完成
C.延伸過(guò)程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸
D.PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比,所需要酶的最適溫度較高
5. 下列關(guān)于PCR技術(shù)的描述,錯(cuò)誤的是( )
A.以DNA復(fù)制為基礎(chǔ)而建立起來(lái)的技術(shù)
B.利用PCR技術(shù)可完全無(wú)誤的擴(kuò)增基因
C.反應(yīng)體系需要模板、引物、四種脫氧核苷酸、耐熱DNA聚合酶和緩沖溶液
D.以變性、復(fù)性和延伸為一個(gè)周期
6. DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)解開的溫度范圍是( ?。?。
A.10~20 ℃ B.80~100 ℃
C.20~30 ℃ D.40~60 ℃
7. 在PCR擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)中,加入一種提取物(一種模板DNA片段),但實(shí)驗(yàn)得到的產(chǎn)物中,卻有兩種DNA。其原因可能是( )
A.基因突變 B.Taq聚合酶發(fā)生變異
C.基因污染 D.溫度過(guò)高
8. PCR儀實(shí)質(zhì)上是一臺(tái)自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器,下列關(guān)于它調(diào)控不同溫度的目的敘述錯(cuò)誤的是( )
A.94 °C,使DNA分子變性,解開螺旋
B.55 °C,引物與作為模板的單鏈DNA特定部位相互配對(duì)、結(jié)合
C.72 °C,使DNA分子開始復(fù)制,延伸
D.72 °C,使DNA分子恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu),恢復(fù)活性
9. PCR是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù),其基本原理和過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制類似.下列關(guān)于兩者共同點(diǎn)的敘述,不正確的是( ?。?
①邊解旋邊復(fù)制
②遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則
③需要引物
④過(guò)程可分為變性、復(fù)性、延伸等步驟.
A.①⑦ B.⑦③
C.③④ D.①④
10. PCR技術(shù)又稱聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),現(xiàn)在已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一種常規(guī)手段,它可以在體外很短的時(shí)間內(nèi)將DNA大量擴(kuò)增。你認(rèn)為以下符合在體外進(jìn)行PCR反應(yīng)條件的一組是( )
① 穩(wěn)定的緩沖液環(huán)境 ② DNA模板 ③ 合成引物 ④ 四種脫氧核苷酸
⑤ DNA聚合酶 ⑥ DNA解旋酶 ⑦ 限制性核酸內(nèi)切酶 ⑧ 溫控設(shè)備
A.①②③④⑤⑥ B.①②③④⑤⑥⑦⑧
C.③④⑤⑥⑧ D.①②③④⑤⑧
參考答案:
1. 答案: D
解析: PCR是體外DNA擴(kuò)增技術(shù),DNA雙鏈的解開不需要解旋酶,而是靠高溫使其變性解體。復(fù)性前,在耐高溫的Taq DNA聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA,因此延伸的溫度要大于復(fù)性溫度但小于變性溫度。
2. 答案: B
解析: 洗滌紅細(xì)胞時(shí),轉(zhuǎn)速要低,時(shí)間要短,否則白細(xì)胞會(huì)與之一起沉淀,達(dá)不到分離目的。
3. 答案: B
解析: 分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱必須有適宜的高度,分離度與柱高相關(guān)。樣品的分布也影響分離度,緩沖溶液的pH影響蛋白質(zhì)所帶的電荷,因此也影響分離度。只有層析柱的直徑一般不會(huì)影響分離度。
4. 答案: C
解析: 變性過(guò)程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對(duì)之間的氫鍵,也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn);復(fù)性過(guò)程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合依靠互補(bǔ)配對(duì)原則完成;延伸過(guò)程中需要DNA聚合酶、ATP、四種脫氧核糖核苷酸;PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比,所需要酶的最適溫度較高
5. 答案: B
解析: 利用PCR技術(shù)也可能會(huì)出現(xiàn)擴(kuò)增的基因出現(xiàn)錯(cuò)誤。故選B
6. 答案: B
解析: 蛋白質(zhì)大多不能忍受60~80 ℃的高溫,而DNA在80 ℃以上才會(huì)變性。
7. 答案: C
解析: 實(shí)驗(yàn)中得到兩種DNA的原因可能是靶細(xì)胞基因污染造成的,所以在實(shí)驗(yàn)中,必須做到隔離操作區(qū)、分裝試劑、簡(jiǎn)化操作程序、使用一次性吸頭等,盡量避免基因污染。
8. 答案: D
解析: PCR利用DNA熱變性的原理,當(dāng)溫度上升到94 °C時(shí),雙鏈DNA解旋為單鏈,A項(xiàng)正確;當(dāng)溫度下降到40~60 °C左右時(shí),兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與兩條單鏈DNA結(jié)合,B項(xiàng)正確;當(dāng)溫度上升到72 ℃左右時(shí),在DNA聚合酶的作用下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈,從而實(shí)現(xiàn)DNA延伸,故C正確,D錯(cuò)誤。
9. 答案: C
解析: 解:①PCR反應(yīng)和體內(nèi)DNA復(fù)制都是邊解旋邊復(fù)制,故①正確;
②PCR反應(yīng)和體內(nèi)DNA復(fù)制都遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,故②正確;
③PCR反應(yīng)需要引物,但體內(nèi)DNA復(fù)制不需要引物,故③錯(cuò)誤;
④PCR過(guò)程可分為變性、復(fù)性、延伸等步驟,而體內(nèi)DNA復(fù)制沒有這些步驟,故④錯(cuò)誤.
故選C.
10. 答案: D
解析: 試題分析:在PCR技術(shù)中,需要的條件有模板、引物、脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶,此外還需要適宜的溫度和pH,故D正確。
考點(diǎn):本題主要考查PCR的過(guò)程,意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。
3
實(shí)驗(yàn)——多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段
1. 在進(jìn)行PCR操作時(shí),如果槍頭受到污染,則會(huì)影響到
A. 復(fù)制循環(huán)速度 B. DNA分子純度 C. DNA分子大小 D. 酶催化活性
2. 下列關(guān)于PCR技術(shù)的敘述,正確的是( )
A. PCR技術(shù)建立在對(duì)擴(kuò)增的目的基因序列完全已知的基礎(chǔ)上
B. 該技術(shù)需要解旋酶和熱穩(wěn)定的DNA聚合酶
C. 該技術(shù)需要一對(duì)特異性的引物,要求一對(duì)引物的序列是互補(bǔ)的
D. 該技術(shù)應(yīng)用體內(nèi)DNA雙鏈復(fù)制原理,也需要模板、原料、能量、酶等條件
3. PCR實(shí)驗(yàn)中用到微量離心管、緩沖液和蒸餾水,使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是( ?。?A.反復(fù)洗滌 B.用酒精擦洗
C.高壓滅菌 D.在-20 ℃保存
4. DNA在波長(zhǎng)為多大的時(shí)候有一強(qiáng)烈的吸收峰( )
A.260nm B.240nm C.280nm D.300nm
5. PCR反應(yīng)的最大特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問(wèn)題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽(yáng)性的產(chǎn)生。下列防止污染的辦法中不包括的是( ?。?A.將樣品的處理、配制PCR反應(yīng)液、PCR循環(huán)擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物的鑒定等步驟分區(qū)或分室進(jìn)行
B.吸樣槍吸樣要慢,吸樣時(shí)盡量一次性完成,槍頭小套、小離心管應(yīng)一次性使用,以免交叉污染
C.所有PCR試劑都應(yīng)放置于大瓶分裝,以減少重復(fù)加樣次數(shù),避免污染機(jī)會(huì)
D.PCR試劑、PCR反應(yīng)液應(yīng)與樣品及PCR產(chǎn)物分開保存,不應(yīng)放于同一冰盒或同一冰箱
6. 在PCR擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)中,加入一種提取物(一種模板DNA片段),但實(shí)驗(yàn)得到的產(chǎn)物卻有2種DNA。其原因可能是( )
A.基因突變 B.Taq聚合酶發(fā)生變異
C.基因污染 D.溫度過(guò)高
7. 關(guān)于PCR技術(shù)的應(yīng)用,錯(cuò)誤的一項(xiàng)是( )
A.古生物學(xué)、刑偵破案、DNA序列測(cè)定
B.診斷遺傳病、基因克隆、古生物學(xué)
C.DNA序列測(cè)定、基因克隆、刑偵破案
D.診斷遺傳病、合成核苷酸、DNA序列測(cè)定
8. PCR利用了DNA熱變性的原理,PCR儀實(shí)際上是一種能自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器,對(duì)PCR過(guò)程中“溫度的控制”的說(shuō)法中錯(cuò)誤的是( )
A.酶促反應(yīng)需要高的溫度,是為了確保模板是單鏈
B.延伸的溫度必須大于復(fù)性溫度,而小于變性溫度
C.DNA聚合酶不具熱變性,要用耐高溫的聚合酶
D.DNA解旋酶不具熱變性,為了確保模板是單鏈
9. 關(guān)于DNA的復(fù)制,下列敘述正確的是( )
A.DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從5′端延伸DNA鏈
B.DNA復(fù)制不需要引物
C.引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)進(jìn)行結(jié)合
D.DNA的合成方向總是從子鏈的3′端向5′端延伸
10. 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過(guò)程一般經(jīng)歷下述三十多次循環(huán):95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)→72℃下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關(guān)PCR過(guò)程的敘述中不正確的是:( )
A.變性過(guò)程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對(duì)之間的氫鍵,也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn)
B.復(fù)性過(guò)程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完成
C.延伸過(guò)程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸
D.PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高
參考答案:
1. 答案: B
解析: ?
2. 答案: D
解析: ?
3. 答案: C
解析: 在PCR實(shí)驗(yàn)中,為了避免外源DNA等因素的污染,微量離心管、槍頭、緩沖液和蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌。同時(shí)也不能忽視其他操作步驟,如緩沖液和酶應(yīng)該分裝成小份,并且在-20 ℃保存。
4. 答案: A
解析: ?
5. 答案: C
解析: 所有的PCR試劑都應(yīng)放置于小瓶分裝,一次性用完,避免因多次使用造成污染。
6. 答案: C
解析: 其原因可能是基因污染。在PCR實(shí)驗(yàn)中,一定要做到隔離操作區(qū)、分裝試劑、簡(jiǎn)化操作程序、使用一次性吸頭等,盡量避免基因污染。
7. 答案: D.
解析: PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)上用于遺傳病的基因診斷、基因克隆、DNA序列測(cè)定,法醫(yī)上用于刑偵破案,古生物學(xué)上用于生物化石樣品分析.PCR技術(shù)是以4種脫氧核苷酸為原料,合成雙鏈DNA的過(guò)程,PCR技術(shù)不能合成核苷酸.
8. 答案: D.
解析: PCR是一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù).DNA雙鏈的解開不需要解旋酶,靠高溫使其變性,雙螺旋結(jié)構(gòu)解體,雙鏈分開,延伸時(shí),在耐高溫的DNA聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA,因此延伸的溫度要大于復(fù)性溫度小于變性溫度.
9. 答案: C
解析: 由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3′端開始延伸;由于DNA分子是反向平行的,子鏈?zhǔn)且罁?jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向是從子鏈5′端向3′端延伸。
10. 答案: C
3
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類型:共享資源
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上傳時(shí)間:2020-01-06
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- 關(guān) 鍵 詞:
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啟東市
高中生物
專題
DNA
蛋白質(zhì)
技術(shù)
課題
多聚酶
鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
擴(kuò)增
片段
練習(xí)
打包
新人
- 資源描述:
-
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