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2019-2020年高考生物 備戰(zhàn)5年真題 專題14 現(xiàn)代生物科技 【xx高考試題】 1.（xx廣東卷）華南虎是國(guó)家一級(jí)保護(hù)動(dòng)物，可采用試管動(dòng)物技術(shù)進(jìn)行人工繁殖，該技術(shù)包括的環(huán)節(jié)有:①轉(zhuǎn)基因 ②核移植 ③體外受精 ④體細(xì)胞克隆 ⑤胚胎移植 A. ①③ B. ①④ C. ②⑤ D. ③⑤ 答案：D 解析：本題考查胚胎工程的應(yīng)用，屬于對(duì)識(shí)記、理解層次的考查。試管動(dòng)物技術(shù)是指把經(jīng)過(guò)體外受精獲得的早期胚胎移植到假孕動(dòng)物子宮發(fā)育而產(chǎn)生的動(dòng)物。 2.（xx浙江卷）將 ada（腺苷酸脫氨酶基因）通過(guò)質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯(cuò)誤的是 A.每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重細(xì)胞質(zhì)粒 B.每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn) C.每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)ada D.每個(gè)插入的ada至少表達(dá)一個(gè)腺苷酸脫氨酶分子 3、（xx江蘇卷）關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是 A．蛋白質(zhì)工程可以合成自然界不存在的蛋白質(zhì) B．體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體 C．植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以用于植物莖尖脫毒 D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培養(yǎng) 答案：B 解析：克隆動(dòng)物應(yīng)用的是細(xì)胞核移植技術(shù)，所以B選項(xiàng)敘述錯(cuò)誤。 4、（xx江蘇卷）下列關(guān)于胚胎工程的敘述，錯(cuò)誤的是 A．體外受精是指獲能的精子和成熟的卵子在相應(yīng)溶液中受精 B．受精卵發(fā)育到原腸胚階段才能進(jìn)行胚胎移植 C．早期胚胎培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液通常都需要加入血清 D．試管嬰兒技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù) 答案：B 解析：受精卵發(fā)育到囊胚階段就可以進(jìn)行胚胎移植，所以B選項(xiàng)的敘述是錯(cuò)誤的。 5.（xx天津卷）下列敘述正確的是 A．胚胎發(fā)育過(guò)程中不存在細(xì)胞衰老或凋亡現(xiàn)象 B．用小鼠不同器官和組織構(gòu)建的cDNA文庫(kù)相同 C．垂體功能受損的幼犬會(huì)出現(xiàn)抗寒能力減弱等現(xiàn)象 D．刺激支配肌肉的神經(jīng)，引起該肌肉收縮的過(guò)程屬于反射 6.（xx浙江卷）培育“試管山羊”的基本過(guò)程如下圖所示。若要培育成功，下列敘述正確的是 A甲過(guò)程中可通過(guò)給母山羊注射有關(guān)激素使用其超數(shù)排卵 B乙過(guò)程的目的之，是促進(jìn)卵母細(xì)胞和精子的成熟 C丙過(guò)程與乙過(guò)程中應(yīng)采用相同成分的培養(yǎng)液 D丁過(guò)程中早期胚胎須移植到與供體性狀相同的代孕母羊子宮內(nèi) 答案：A 解析：本題考查有關(guān)體外受精等相關(guān)的知識(shí)。首先是精子的采集和獲能，卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)，在此過(guò)程中為了讓雌性動(dòng)物排出更多的卵母細(xì)胞，甲應(yīng)為對(duì)雌性動(dòng)物采用注 射促性腺激素讓其超數(shù)排卵，乙過(guò)程是促進(jìn)其完成體外受精，丙過(guò)程是早期胚胎發(fā)育過(guò)程，丁過(guò)程是在母體內(nèi)完成胚胎發(fā)育全過(guò)程；所以A選項(xiàng)是正確的；乙過(guò)程是完成受精作用，所以B選項(xiàng)是錯(cuò)誤的；C選項(xiàng)是乙過(guò)程在專用獲能培養(yǎng)液或受精溶液中，而丙過(guò)程是細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程，所以培養(yǎng)液的成分是不同，C錯(cuò)誤；D選項(xiàng)中早期胚胎移植到與供體處于同期發(fā)情即同時(shí)采用促性腺激素處理的母體內(nèi)，所以D選項(xiàng)是錯(cuò)誤的。 7.（xx安徽卷）Ⅱ.（9分）家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。 (1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用___________酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞。 (2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_________和___________之間。 (3)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。改PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴(kuò)增緩沖液（含Mg2+）、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。 (4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。 8、（xx江蘇卷）請(qǐng)回答基因工程方面的問(wèn)題：（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其原理與細(xì)胞同DNA復(fù)制類似（如下圖所示）。 圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。 ①?gòu)睦碚撋贤茰y(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例為　▲　。 ②在第　▲　輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段。 （2）設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物（只標(biāo)注了部分堿基序列）都不合理（如下圖），請(qǐng)分別說(shuō)明理由。 ① 第1組：　▲?。虎诘诙M　▲　。 （3）PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因?yàn)椤　　? （4）用限制酶EcoR、MboⅠ 單 獨(dú)或立命切割同一種質(zhì)料，得到的DNAT片段長(zhǎng)度如下圖（1kb即1000個(gè)堿基對(duì)），請(qǐng)?jiān)诖痤}卡的指定位置畫出質(zhì)料上EcoR、MboⅠ 的切割位點(diǎn)。 答案：（1）15/16 三（2）引物和引物局部發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效 引物自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效 （3）DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上 （4）見下圖 Mbol Mbol 2.5kb 5.5kb 6kb 質(zhì)粒 EcoRv 9.T-DNA可隨機(jī)插入植物基因組內(nèi)，導(dǎo)致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導(dǎo)擬南芥產(chǎn)生突變體的過(guò)程如下：種植野生型擬南芥，待植株形成花蕾時(shí)，將地上部分浸入農(nóng)桿菌（其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因）懸浮液中以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。在適宜條件下培養(yǎng)，收獲種子（稱為T1代）。 (1)為促進(jìn)植株側(cè)枝發(fā)育以形成更多的花蕾，需要去除，因?yàn)楹笳弋a(chǎn)生的會(huì)抑制側(cè)芽的生長(zhǎng)。 (2)為篩選出已轉(zhuǎn)化的個(gè)體，需將T1代播種在含的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，成熟后自交，收獲種子（稱為T2代）。 (3)為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將T2代播種在含的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。 (4)經(jīng)過(guò)多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起，需將該突變體與植株進(jìn)行雜交，再自交代后統(tǒng)計(jì)性狀分離比。 (5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失，從該突變體的表現(xiàn)型可以推測(cè)野生型基因的存在導(dǎo)致植物的抗鹽性。 (6)根據(jù)T—DNA的已知序列，利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增出被插入的基因片段。其過(guò)程是：提取一植株的DNA，用限制酶處理后，再用將獲得的DNA片段連接成環(huán)（如右圖），以此為模板，從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取作為引物進(jìn)行擴(kuò)增，得到的片段將用于獲取該基因的全序列信息。 10（xx福建卷）一對(duì)表現(xiàn)型正常的夫婦，生了一個(gè)鐮刀型細(xì)胞貧血癥（常染色體隱性遺傳?。┗純?。在他們欲生育第二胎時(shí)，發(fā)現(xiàn)妻子的雙側(cè)輸卵管完全堵塞，不能完成體內(nèi)受精。醫(yī)生為該夫婦實(shí)施了體外受精和產(chǎn)前基因診斷，過(guò)程如右圖。 請(qǐng)回答： （1）過(guò)程①是指在體外進(jìn)行的處理，從而使精子與卵子結(jié)合形成受精卵；過(guò)程②稱為。 （2）在對(duì)胎兒進(jìn)行鐮刀形細(xì)胞貧血癥的產(chǎn)前基因診斷時(shí)，要先從羊水中的胎兒細(xì)胞提取物質(zhì)③進(jìn)行PCR擴(kuò)增。然后用Ⅱ?qū)U(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行切割，產(chǎn)生多個(gè)片段的酶切產(chǎn)物。據(jù)此判斷，Ⅱ是一種酶。 （3）不同長(zhǎng)度的酶切產(chǎn)物在電泳時(shí)移動(dòng)的速率不同，形成不同的電泳條帶。該家庭成員的鐮刀型細(xì)胞貧血癥基因分析的電泳帶譜如④，據(jù)此判斷胎兒為（正常/患者/攜帶者）。 11.（xx山東卷）人類疾病的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型常用于致病機(jī)理的探討及治療藥物的篩選。（3）子代大鼠如果________和__________，即可分別在分子水平和個(gè)體水平上說(shuō)明高血壓相關(guān)基因已成功表達(dá)，然后可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型。 （4）在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過(guò)程中，所用到的主要胚胎工程技術(shù)是___________、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。 12.（xx四川卷）北極比目魚中有抗凍基因,其編碼的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強(qiáng)。下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過(guò)程示意圖，有關(guān)敘述正確的是 A過(guò)程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測(cè)序 B多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白 C過(guò)程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選 D應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá) 答案：B 解析：過(guò)程1獲得的目的基因已不含非編碼區(qū)和內(nèi)含子，因此不能用于比目魚基因組測(cè)序，因此A錯(cuò)。導(dǎo)入農(nóng)桿菌是為了擴(kuò)增和更易導(dǎo)入蕃茄細(xì)胞，C錯(cuò)。DNA探針技術(shù)不能檢測(cè)基因是否完全表達(dá)，D錯(cuò)。 13.（xx廣東卷） 登革熱病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖，蚊子在叮咬人時(shí)將病毒傳染給人，可引起病人發(fā)熱、出血甚至休克?？茖W(xué)家用以下方法控制病毒的傳播。 （1）將S基因轉(zhuǎn)入蚊子體內(nèi)，使蚊子的唾液腺細(xì)胞大量表達(dá)S蛋白，該蛋白可以抑制登革熱病毒的復(fù)制。為了獲得轉(zhuǎn)基因蚊子，需要將攜帶S基因的載體導(dǎo)入蚊子的細(xì)胞。如果轉(zhuǎn)基因成功，在轉(zhuǎn)基因蚊子體內(nèi)可檢測(cè)出、和。 （2）科學(xué)家獲得一種顯性突變蚊子（AABB）。A、B基因位于非同源染色體上，只有A或B基因的胚胎致死。若純合的雄蚊（AABB）與野生型雌蚊（aabb）交配，F(xiàn)1群體中A基因頻率是，F(xiàn)2群體中A基因頻率是。 （3）將S基因分別插入到A、B基因的緊鄰位置（如圖11），將該純合的轉(zhuǎn)基因雄蚊釋放到野生群體中，群體中蚊子體內(nèi)病毒的平均數(shù)目會(huì)逐代，原因是。 14.（xx重慶卷）擬南芥是遺傳學(xué)研究的模式植物，某突變體可用于驗(yàn)證相關(guān)的基因的功能。野生型擬南芥的種皮為深褐色（TT），某突變體的種皮為黃色（tt）,下圖是利用該突變是.若③的種皮顏色為，則說(shuō)明油菜基因與擬南芥T基因的功能相同。 （3）假設(shè)該油菜基因連接到擬南芥染色體并替換其中一個(gè)t基因，則③中進(jìn)行減數(shù)分裂的細(xì)胞在聯(lián)會(huì)時(shí)的基因?yàn)?；同時(shí)，③的葉片卷曲（葉片正常對(duì)葉片卷曲為顯性，且與種皮性狀獨(dú)立遺傳），用它與種皮深褐色、葉片正常的雙雜合體擬南芥雜交，其后代中所占比列最小的個(gè)體表現(xiàn)為；?、鄣那o尖培養(yǎng)成16顆植珠，其性狀通常 （填 不變或改變）。 （4）所得的轉(zhuǎn)基因擬南芥與野生型擬南芥（填是或者不是）同一個(gè)物種。 答案：（1）2 （2）重組質(zhì)粒（重組DNA分子）；重組質(zhì)粒未導(dǎo)入；深褐色 （3）TnTnt t。；黃色正常、黃色卷曲；不變 （4）是 解析：通過(guò)對(duì)基因工程和遺傳知識(shí)相結(jié)合來(lái)考查學(xué)生對(duì)該部分知識(shí)的掌握，屬中檔題，較難。油菜Tn基因的mRNA中UGA變?yōu)锳GA，而末端序列為“——AGCGCGACCAGACUCUAA——”，在擬南芥中的UGA本是終止密碼子不編碼氨基酸，而在油菜中變?yōu)锳GA可編碼一個(gè)氨基酸，而CUC還可編碼一個(gè)氨基酸，直到UAA終止密碼子不編碼氨基酸。假設(shè)油菜Tn基因連接到擬南芥染色體并替換其是一個(gè)t基因，注意擬南芥是指實(shí)驗(yàn)有的突變體tt，所以③轉(zhuǎn)基因擬南芥基因型為Tnt，減數(shù)分裂聯(lián)會(huì)時(shí)形成四分體是由于染色體進(jìn)行了復(fù)制，基因也進(jìn)行了復(fù)制，因而基因型為TnTnt t。 設(shè)③轉(zhuǎn)基因擬南芥的葉片卷曲與正常葉是由B、b基因控制，正常葉為顯性，而該對(duì)性狀與種皮性狀為獨(dú)立遺傳，則這兩對(duì)性狀遵循基因的分離與自由組合定律。則： ③轉(zhuǎn)基因擬南芥 ╳ 雙雜合擬南芥 Tntbb TtBb 進(jìn)行逐對(duì)分析：Tnt╳Tt 1/4TnT 、 1/4Tnt、1/4 Tt 、1/4tt 由于Tn和T的功能相同，所以表示為3/4T--（深褐色）、1/4tt（黃色） bb╳Bb 1/2 Bb（正常葉）、1/2 bb（卷曲葉） 所以后代中有四種表現(xiàn)型； 3/8種皮深褐色正常葉；3/8種皮深褐色卷曲葉 1/8種皮黃色正常葉；1/8種皮黃色卷曲葉 ?、坜D(zhuǎn)基因擬南芥的莖尖培養(yǎng)為植物組織培養(yǎng)為無(wú)性生殖，所以后代性一般不變。（排除基因突變） 由上可知所得③轉(zhuǎn)基因擬南芥Tnt和野生型擬南芥TT兩個(gè)品種相當(dāng)于發(fā)生基因突變，沒(méi)有隔離，能雜交產(chǎn)生可育后代，因此是同一個(gè)種。 15.（xx天津卷）絮凝性細(xì)菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能與石油污水中的懸（4）目的菌株的篩選：篩選既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有_________________的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的AB融合菌，選擇效果最好的最為目的菌株。 （5）為探究目的菌株不同發(fā)酵時(shí)間發(fā)酵液的絮凝效果，將目的菌株進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，定時(shí)取發(fā)酵液，加入石油污水中：同時(shí)設(shè)置_____________________________為對(duì)照組。經(jīng)攪拌、靜置各3分鐘后，分別測(cè)定上層水樣的石油濃度COD值（COD值越高表示有機(jī)物污染程度越高）,計(jì)算石油去除率和COD去除率，結(jié)果如下圖。 （6）目的菌的種群增長(zhǎng)曲線是_____________型。在40～44小時(shí)，發(fā)酵液對(duì)石油污水的凈化效果最好，其原因是___________________________________________________。 16（xx新課標(biāo)全國(guó)卷）現(xiàn)有一生活污水凈化處理系統(tǒng)，處理流程為“厭氧沉淀池曝光池兼氧池植物池”，其中植物池中生活著水生植物、昆蟲、魚類、蛙類等生物。污水經(jīng)凈化處理后，可用于澆灌綠地?；卮饐?wèn)題： （1）經(jīng)厭氧沉淀池。曝氣池和兼氧池后得到初步凈化。在這個(gè)過(guò)程中，微生物通過(guò) 呼吸將有機(jī)物分解。 （2）植物池中，水生生物、昆蟲、魚類、蛙類和底泥中的微生物共同組成了（生態(tài)系統(tǒng)、菌落、種群）。在植物池的食物網(wǎng)中，植物位于第營(yíng)養(yǎng)級(jí)。植物池中所有蛙類獲得的能量最終來(lái)源于所固定的能。 （3）生態(tài)工程所遵循的基本原理有整體性、協(xié)調(diào)與平衡、和等原理。一般來(lái)說(shuō)，生態(tài)工程的主要任務(wù)是對(duì)進(jìn)行修復(fù)，對(duì)造成環(huán)境污染和破壞的生產(chǎn)方式進(jìn)行改善，并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力。 答案：（1）有氧和無(wú)氧（或細(xì)胞） （2）群落 一 生產(chǎn)者 太陽(yáng)能 （3）物種多樣性 物質(zhì)循環(huán)再生 （4）已被破壞的生態(tài)環(huán)境（或受損的生態(tài)系統(tǒng)） 解析：本題綜合考查群落和生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)、生態(tài)工程的基本原理等相關(guān)知識(shí)。屬于對(duì)識(shí)記層次的考查。（1）在厭氧沉淀池，微生物進(jìn)行無(wú)氧呼吸；在曝氣池，微生物主要進(jìn)行有氧呼吸；在兼氧池，微生物既能進(jìn)行有氧呼吸，又能進(jìn)行無(wú)氧呼吸。（2）群落是棲息于一定地域或生境中各種生物種群通過(guò)相互作用而有機(jī)結(jié)合的集合體，包括給定區(qū)域的所有生物。（3）生態(tài)工程的基本原理包括物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理、系統(tǒng)學(xué)與工程學(xué)原理。（4）見答案。 【xx年高考試題】 1.（xx浙江卷）2.在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過(guò)程中，下列操作錯(cuò)誤的是（ ） A. 用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草茶葉病毒的核酸 B. 用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體 C. 將重組DNA分子導(dǎo)入原生質(zhì)體 D. 用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞 答案：A 解析：本題考查基因工程的有關(guān)知識(shí)，基因工程的一般過(guò)程：①用限制性核酸內(nèi)切酶切割含目的基因的DNA分子（除草劑基因）和運(yùn)載體（質(zhì)粒），②用DNA連接酶連接切割好的目的基因和運(yùn)載體③重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞，因?yàn)槭侵参锟梢哉f(shuō)是原生質(zhì)體④用相應(yīng)的試劑和病原體帥選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞⑤用植物組織培養(yǎng)技術(shù)抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草（表達(dá)）。所以答案A。 2.（xx福建卷）32．[生物—現(xiàn)代生物科技專題](10分) 紅細(xì)胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病由于天然EP0來(lái)源極為有限，目前臨床使用的紅細(xì)胞生成素主要來(lái)自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO）期間要生產(chǎn)流程如右圖 （1）圖中①所指的是技術(shù)。 （2）圖中②所指的物質(zhì)是，③所指的物質(zhì)是 。 （3）培養(yǎng)重組CHO 細(xì)胞時(shí)，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞嚴(yán)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定期更換。 （4）檢測(cè) rhEPO外活性需用抗rhEPO單克隆抗體。分泌單克隆抗體的細(xì)胞，可由rhEPO免疫過(guò)的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成 答案：（1）PCR （2）mRNA rhEPO （3）培養(yǎng)液 （4）雜交瘤 解析：本題主要以人紅細(xì)胞生成素生產(chǎn)為材料來(lái)考查基因工程和細(xì)胞工程中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技 術(shù)、制備單克隆抗體技術(shù)。獲取目的基因的方法有四種（從基因文庫(kù)中獲取、用PCR擴(kuò)增技術(shù)、用反轉(zhuǎn)錄法、用化學(xué)合成法）由圖以核DNA為模板獲得目的基因的方法可知①為PCR技術(shù)。進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄的模板是mRNA。由題意可知重組CHO細(xì)胞適用于生產(chǎn)重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO），所以重組CHO細(xì)胞能過(guò)表達(dá)出重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO）或者紅細(xì)胞生成素。培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞是用液體培養(yǎng)基——即培養(yǎng)液，細(xì)胞從培養(yǎng)液中吸收營(yíng)養(yǎng)，并同時(shí)向培養(yǎng)液中排放代謝廢物，當(dāng)代謝廢物積累時(shí)會(huì)危害細(xì)胞，因此要不斷更新培養(yǎng)液。制備單克隆抗體是讓淋巴B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，然后由雜交瘤細(xì)胞來(lái)分泌抗體。 3.（xx全國(guó)2）5. 下列敘述符合基因工程概念的是 A．B淋巴細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合，雜交瘤細(xì)胞中含有B淋巴細(xì)胞中的抗體基因 B．將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株 C．用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過(guò)篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株 D．自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上 【解析】A:屬于動(dòng)物細(xì)胞工程的內(nèi)容C: 屬于微生物的發(fā)酵工程的內(nèi)容D:自然狀態(tài)下，一般不能自行形成重組DNA分子 4.（xx廣東卷）22.新技術(shù)的建立和應(yīng)用對(duì)生物學(xué)發(fā)展至關(guān)重要。下列技術(shù)（或儀器）與應(yīng)用匹配正確的是 1. PCR技術(shù)——擴(kuò)增蛋白質(zhì) B.雜交瘤技術(shù)——制備單克隆抗體 C.光學(xué)顯微鏡——觀察葉綠體的基粒 D.花粉離體培養(yǎng)——培育單倍體植物 【解析】本題主要考查學(xué)生的理解能力。PCR技術(shù)只能用來(lái)擴(kuò)增核酸，不能用來(lái)擴(kuò)增蛋白質(zhì)；利用光學(xué)顯微鏡無(wú)法觀察到葉綠體。 【答案】BD 5.（xx天津卷）7.（26分） Ⅰ.（14分）下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是 （填字母代號(hào)）。 A.啟動(dòng)子 B. tetR C.復(fù)制原點(diǎn) D. ampR （3）過(guò)程①可采用的操作方法是 （填字母代號(hào)）。 A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 B. 大腸桿菌轉(zhuǎn)化 C.顯微注射 D. 細(xì)胞融合 （4）過(guò)程②可采用的生物技術(shù)是 。 （5）對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過(guò)程②可獲得多個(gè)新個(gè)體。這利用了細(xì)胞的 性。 （6）為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用 （填字母代號(hào)）技術(shù)。 A.核酸分子雜交 B. 基因序列分析 C.抗原—抗體雜交 D. PCR 【答案】Ⅰ.（14分） （1） HindⅢ和BamHⅠ；氨芐青霉素 （2） A （3） C （4） 胚胎移植技術(shù) （5） 全能 （6） C 率增加，B項(xiàng)錯(cuò)誤；動(dòng)物生長(zhǎng)素基因轉(zhuǎn)入植物后也能表達(dá)，C項(xiàng)錯(cuò)誤；轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性問(wèn)題，要通過(guò)驗(yàn)證才能得到證實(shí)，D項(xiàng)錯(cuò)誤。 7.（xx江蘇卷）27．（8分）下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圈l、圈2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： （1）一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma Ⅰ切割前后，分別含有 ▲ 個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。 （2）若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越 ▲ 。 （3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是 ▲ 。 （4）與只使用EcoR I相比較，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止 ▲ 。 （5）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入 ▲ 酶。 （6）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了 ▲ 。 （7）為了從cDNA文庫(kù)中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在 ▲ 的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達(dá)的初步檢測(cè)。 【答案】（1）0、2 （2）高 （3）SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 （4）質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化 （5）DNA連接 （6）鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞 （7）蔗糖為唯一含碳營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 收蔗糖，因此可利用蔗糖作為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)受體細(xì)胞，含有重組質(zhì)粒的細(xì)胞才能存活，不含有重組質(zhì)粒的因不能獲得碳源而死亡，從而達(dá)到篩選目的。 8.（xx海南卷）26．（18分）［選修模塊3：現(xiàn)代生物科技專題］ 請(qǐng)回答胚胎工程和基因工程方面的問(wèn)題： （1）應(yīng)用胚胎工程技術(shù)可以培育出“試管?！?。試管牛的培育需經(jīng)過(guò)體外受精、＿＿＿＿、＿＿＿＿＿以及在母體中發(fā)育和產(chǎn)出等過(guò)程。 （2）在“試管牛”的培育過(guò)程中，要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對(duì)精子進(jìn)行處理，使其＿＿＿＿＿。另外，培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，該時(shí)期在顯微鏡下可觀察到次級(jí)卵母細(xì)胞和＿＿＿＿＿。 （3）通常奶牛每次排出一枚卵母細(xì)胞，采用激素處理可使其一次排出多枚卵母細(xì)胞，常使用的激素是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 （4）利用基因工程可以獲得轉(zhuǎn)基因牛，從而改良奶牛的某些性狀?；蚬こ痰乃膫€(gè)基本操作步驟是＿＿＿＿＿＿＿、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿。若要獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中含有人干擾素，則所構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須包括：某種牛乳腺分泌蛋白基因及其啟動(dòng)子、＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿和復(fù)制原點(diǎn)等。將該基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞所采用的方法是＿＿＿＿＿（顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法），為獲得能大量產(chǎn)生人干擾素的轉(zhuǎn)基因牛，該基因表達(dá)載體應(yīng)導(dǎo)入的受體細(xì)胞是＿＿＿＿＿（受精卵、乳腺細(xì)胞）。 【答案】 （1）早期胚胎培養(yǎng)（1分）　　胚胎移植（2分） （2）獲能　　第一極體（每空1分，共2分） （3）促性腺激素（其他合理答案也給分）（2分） （4）獲取目的基因（2分）　　將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（2分） 目的基因的檢測(cè)與鑒定（2分）　　人干擾素基因（或目的基因）（1分） 終止子（1分）　　標(biāo)記基因（1分）　　顯微注射法（1分）　　受精卵（1分） 9.（xx浙江卷）4.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是(D) A. 培養(yǎng)保留接觸抵制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞 B. 克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程上多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變 C. 二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的 D. 惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行付代培養(yǎng) 解析：本題主要考查細(xì)胞工程的有關(guān)知識(shí)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可以分為原代培養(yǎng)，原代培養(yǎng)到一定程度后要進(jìn)行傳代,因?yàn)榧?xì)胞有接觸抑制現(xiàn)象,當(dāng)細(xì)胞接觸時(shí)就會(huì)停止分裂(在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中進(jìn)行的為有絲分裂,所以培養(yǎng)出來(lái)的多數(shù)細(xì)胞基因型相同),但是細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中,傳代次數(shù)也是有限的,一般為50次就會(huì)死亡,留下來(lái)的細(xì)胞就是發(fā)生了癌變的細(xì)胞,遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,具有不死性,但是仍保留接觸抑制現(xiàn)象,所以還是要傳代培養(yǎng),這個(gè)也就是人體中癌細(xì)胞會(huì)轉(zhuǎn)移的原因,所以答案為D. 10.（xx浙江卷）30．蘇云金芽孢桿菌產(chǎn)生的毒蛋白能使螟蟲死亡。研究人員將表達(dá)這種毒蛋白的抗螟蟲基因轉(zhuǎn)入非糯性抗稻瘟病水稻的核基因組中，培育出一批轉(zhuǎn)基因抗螟水稻。請(qǐng)回答： （1）染色體主要由＿＿＿＿＿＿＿＿組成，若要確定抗螟基因是否已整合到水稻的某一染色體上，方法之一是測(cè)定該染色體的＿＿＿＿＿＿＿。 （2）選用上述抗螟非糯性水稻與不抗螟糯性水稻雜交得到F1，從F1中選取一株進(jìn)行自交得到F2，F(xiàn)2的結(jié)果如下表： 表現(xiàn)型　　　抗螟非糯性　　　抗螟糯性　　　不抗螟非糯性　　不抗螟糯性 個(gè)體數(shù)　　　　142　　　　　　　48　　　　　　　50　　　　　　　16 分析表中數(shù)據(jù)可知，控制這兩對(duì)性狀的基因位于＿＿＿＿染色體上，所選F1植株的表現(xiàn)型為＿＿＿＿＿。親本中抗螟非糯性水稻可能的基因型最多有＿＿＿＿＿種。 （3）現(xiàn)欲試種這種抗螟水稻，需檢驗(yàn)其是否為純合子，請(qǐng)用遺傳圖解表示檢驗(yàn)過(guò)程（顯、隱性基因分別用B、b表示），并作簡(jiǎn)要說(shuō)明。 （4）上表中的抗螟水稻均能抗稻瘟?。沟疚敛轱@性性狀），請(qǐng)簡(jiǎn)要分析可能的原因。 ①＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 ②＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 解析：本題主要考查遺傳方面的知識(shí)，需要掌握兩對(duì)等位基因的遺傳性狀和遺傳圖解的規(guī)范書寫，該題從染色體的組成開始，借助轉(zhuǎn)基因的相關(guān)知識(shí)，然后就研究?jī)蓪?duì)相對(duì)性狀的遺傳性、（9:3:3:1），但是特別需要弄清出在這個(gè)題目中有三個(gè)相對(duì)性狀抗螟蟲和不抗螟蟲、非糯性和糯性、抗稻瘟病和不抗稻瘟病，審題仔細(xì)了第（4）小題就不會(huì)做錯(cuò)。 （3） 把改抗螟水稻和不抗螟水稻進(jìn)行雜交，若出現(xiàn)性狀分離則為雜合子，若沒(méi)有性狀分離，則為生成素(rhEPO），所以重組CHO細(xì)胞能過(guò)表達(dá)出重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO）或者紅細(xì)胞生成素。培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞是用液體培養(yǎng)基——即培養(yǎng)液，細(xì)胞從培養(yǎng)液中吸收營(yíng)養(yǎng)，并同時(shí)向培養(yǎng)液中排放代謝廢物，當(dāng)代謝廢物積累時(shí)會(huì)危害細(xì)胞，因此要不斷更新培養(yǎng)液。制備單克隆抗體是讓淋巴B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，然后由雜交瘤細(xì)胞來(lái)分泌抗體。 12.（xx山東高考理綜）35. 【生物-現(xiàn)代生物科技專題】胚胎工程是一項(xiàng)綜合性的動(dòng)物繁育技術(shù)，可在畜牧業(yè)和制藥業(yè)等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。下圖是通過(guò)胚胎工程培育試管牛的過(guò)程。 （1）從良種母牛采集的卵母細(xì)胞，都需要進(jìn)行體外培養(yǎng)，其目的是_____；從良種公牛采集的精子需_____后才能進(jìn)行受精作用。 （2）在體外培養(yǎng)受精卵時(shí)，除了給予一定量的O2以維持細(xì)胞呼吸外，還需要提供____氣體以維持____。 （3）圖中過(guò)程A稱為_____，它在胚胎工程中的意義在于_____。 （4）研制能夠產(chǎn)生人類白細(xì)胞介素的牛乳腺生物反應(yīng)器，需將目的的基因?qū)肱Ｊ芫?，最常用的?dǎo)入方法是____；獲得轉(zhuǎn)基因母牛后，如果_____即說(shuō)明目的基因已經(jīng)表達(dá)。 【答案】 （1）使卵母細(xì)胞成熟（或：使卵母細(xì)胞獲得受精能力）； 獲能 （2）CO2 ； 培養(yǎng)液（基）的pH （3）胚胎移植 提高優(yōu)良母畜的繁殖率。 （4）顯微注射法 牛奶中含有人類白細(xì)胞介素（或：牛乳腺細(xì)胞已合成人類白細(xì)胞介素） 13.（xx江蘇卷）16．下列關(guān)于利用胚胎工程技術(shù)繁殖優(yōu)質(zhì)奶羊的敘述．錯(cuò)誤的是 A．對(duì)受體母羊與供體母羊進(jìn)行同期發(fā)情處理 B．人工授精后的一定時(shí)間內(nèi)，收集供體原腸胚用于胚胎分割 C．利用胚胎分剖技術(shù)可以獲得兩個(gè)基因型完全相同的胚胎 D．一次給受體母羊檀人多個(gè)胚胎．可增加雙胞胎和多胞胎的比例 【答案】B 【解析】本題考查了胚胎工程及考生理解問(wèn)題的能力。進(jìn)行胚胎分割要用囊胚或桑椹胚期的胚胎，B項(xiàng)錯(cuò)誤。 14.（xx江蘇卷）17．老年癡呆癥患者的腦血管中有一種特殊的β一淀粉樣蛋白體，它的逐漸積累可能導(dǎo)致神經(jīng)元損傷和免疫功能下降．某些基因的突變會(huì)導(dǎo)致β一淀粉樣蛋白體的產(chǎn)生和積累。下列技術(shù)不能用于老年癡呆癥治療的是 A．胚胎移植技術(shù) B．胚胎干細(xì)胞技術(shù) c．單克隆抗體技術(shù) D．基因治療技術(shù) 【答案】A 【解析】本題考查了現(xiàn)代生物技術(shù)的應(yīng)用。采用胚胎干細(xì)胞技術(shù)可以產(chǎn)生新的神經(jīng)元細(xì)胞，單克隆抗體技術(shù)定向改善免疫能力，基因治療技術(shù)可以從基因水平對(duì)老年癡呆進(jìn)行治療，而胚胎移植技術(shù)則不能治療老年癡呆，正確選項(xiàng)為A 【xx年高考試題】 1.（xx安徽卷）4．xx年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白“的三位科學(xué)家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來(lái)組成一個(gè)融合基因，再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)就會(huì)帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是 A．追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過(guò)程 B．追蹤目的基因插入到染色體上的位置 C．追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布 D．追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu) 【答案】C 【解析】將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來(lái)組成一個(gè)融合基因，將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)帶有綠色熒光，從而可以追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布。故C正確。 2.（xx浙江卷）3．下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是 A．目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物 B．限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶 C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性 D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá) 【答案】D 【解析】基因工程中目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物；常用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶；人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性，只有經(jīng)過(guò)一定的物質(zhì)激活以后，才有生物活性。載體上的抗性基因主要是有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞，不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)。所以D錯(cuò)誤。 3.（xx廣東理基）45．錢永健先生因在研究綠色熒光蛋白方面的杰出成就而獲xx年諾貝爾獎(jiǎng)。在某種生物中檢測(cè)不到綠色熒光，將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入該生物體內(nèi)后，結(jié)果可以檢測(cè)到綠色熒光。由此可知 A．該生物的基因型是雜合的 B．該生物與水母有很近的親緣關(guān)系 C．綠色熒光蛋白基因在該生物體內(nèi)得到了表達(dá) D．改變綠色熒光蛋白基因的1個(gè)核苷酸對(duì)，就不能檢測(cè)到綠色熒光 【答案】C 【解析】某種生物中檢測(cè)不到綠色熒光，將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入該生物體內(nèi)后，結(jié)果可以檢測(cè)到綠色熒光，說(shuō)明綠色熒光蛋白基因在該生物體內(nèi)得到了表達(dá)。 4.（xx重慶卷）2.下表有關(guān)基因表達(dá)的選項(xiàng)中，不可能的是 基因 表達(dá)的細(xì)胞 表達(dá)產(chǎn)物 A 細(xì)菌抗蟲蛋白基因 抗蟲棉葉肉細(xì)胞 細(xì)菌抗蟲蛋白 B 人酪氨酸酶基因 正常人皮膚細(xì)胞 人酪氨酸酶 C 動(dòng)物胰島素基因 大腸桿菌工程菌細(xì)胞 動(dòng)物胰島素 D 兔血紅蛋白基因 兔成熟紅細(xì)胞 兔血紅蛋白 【答案】D 【解析】抗蟲棉葉肉細(xì)胞中存在細(xì)菌抗蟲蛋白基因，細(xì)菌抗蟲蛋白基因能夠表達(dá)產(chǎn)生細(xì)菌抗蟲蛋白；正常人皮膚細(xì)胞中含有人酪氨酸酶基因，人酪氨酸酶基因能夠表達(dá)產(chǎn)生人酪氨酸酶；大腸桿菌工程菌細(xì)胞存在動(dòng)物胰島素基因，動(dòng)物胰島素基因能夠表達(dá)產(chǎn)生動(dòng)物胰島素；兔成熟紅細(xì)胞中無(wú)細(xì)胞核，所以無(wú)兔血紅蛋白基因不能表達(dá)產(chǎn)生兔血紅蛋白。此題為容易題，識(shí)記理解類。 5.（xx上海理綜卷）20．科學(xué)家運(yùn)用基因工程技術(shù)將人胰島素基因與大腸桿菌的質(zhì)粒DNA分子重組，并且在大腸桿菌體內(nèi)獲得成功表達(dá)。圖示a處為胰島素基因與大腸桿菌質(zhì)粒DNA結(jié)合的位置，它們彼此能結(jié)合的依據(jù)是 A．基因自由組合定律 B．半保留復(fù)制原則 C．基因分離定律 D．堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 【答案】D 【解析】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，重組質(zhì)粒依據(jù)的是粘性末端的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。 6.（xx天津卷）8．（30分）水稻種子中70％的磷以植酸形式存在。植酸易同鐵、鈣等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外，是多種動(dòng)物的抗?fàn)I養(yǎng)因子，同時(shí)，排出的大量磷進(jìn)入水體易引起水華。 （1）磷元素除了形成植酸外，還可以出現(xiàn)在下列_____________分子或結(jié)構(gòu)中（多選）。 A.核糖 B.ATP C.核糖體 D.核膜 （2）種植蘆葦能有效抑制水華的發(fā)生，表明蘆葦與引起水華的藻類關(guān)系是_____________。 （3）植酸酶可降解植酸，在谷物類飼料中添加植酸酶可提高飼料的_____________ 利用率。 （4）酵母菌中植酸的活性較高。下圖是從不同類型酵母菌的發(fā)酵液中提取植酸酶的工藝流程。 據(jù)圖回答： ①植酸酶________________（Ⅰ/Ⅱ）屬于分泌蛋白。 ②若植酸酶Ⅰ和Ⅱ的肽鏈組成不同，其差異體現(xiàn)在______________________。 ③提純的植酸酶需做活性條件測(cè)定。右圖為測(cè)定結(jié)果。 圖中的自變量可為____________________________(答一種)； 因變量可以通過(guò)測(cè)定______________________來(lái)表示。 （5）為從根本上解決水稻中的高植酸問(wèn)題，可將植酸酶基因?qū)胨?，培育低植酸轉(zhuǎn)基因水稻品種。下圖是獲取植酸酶基因的流程。 據(jù)圖回答： ①圖中基因組文庫(kù)____________（小于/等于/大于）cDNA文庫(kù)。 ②B過(guò)程需要的酶是______________；A、C過(guò)程中_____________（可以/不可以）使用同一種探針篩選含目的基因的菌株。 ③目的基因Ⅰ和Ⅱ除從構(gòu)建的文庫(kù)中分離外，還可以分別利用圖中___________。和_____________為模板直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增，該過(guò)程中所用酶的顯著特點(diǎn)是_________________________。 （6）已獲得的轉(zhuǎn)植酸酶基因水稻品系植酸含量低，但易感病，下圖為選育低植酸抗病水稻品種的過(guò)程。圖中兩對(duì)相對(duì)性形狀分別由兩對(duì)基因控制，并獨(dú)立遺傳。 采用上圖育種過(guò)程，需從_______________代開始篩選，經(jīng)篩選淘汰后，在選留的植株中低植酸抗病純合體所占的比例是______________。選留植株多代自交，經(jīng)篩選可獲得低植酸抗病性狀穩(wěn)定的品性。 【答案】 （1）BCD （2）競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系 （3）營(yíng)養(yǎng)成分 （4）①I ②氨基酸的種類、數(shù)量和排列順序不同 ③溫度（或PH） 單位時(shí)間內(nèi)植酸的降解量（或植酸降解產(chǎn)物的生成量） （5）①大于 ②逆轉(zhuǎn)錄酶 可以 ③DNA cDNA耐高溫 （6）F2 1/9 【解析】本題考查物質(zhì)的元素組成、生物的種間關(guān)系、蛋白質(zhì)、酶、基因工程、遺傳定律的相關(guān)知識(shí)，涉及的知識(shí)點(diǎn)較多，綜合性很強(qiáng)。（1）只有核糖中不含磷元素，ATP（磷酸基團(tuán)）、核糖體（含RNA）、核膜（含磷脂）中均含有磷元素。（2）蘆葦能抑制水華的發(fā)生，表明蘆葦與水華的藻類關(guān)系是競(jìng)爭(zhēng)。（3）植酸易同鐵、鈣等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外，是多種動(dòng)物的抗?fàn)I養(yǎng)因子，而植酸酶可降解植酸，因此在谷物類飼料中添加植酸酶可提高飼料的營(yíng)養(yǎng)成分的利用率。（4）分析圖可知，植酸酶Ⅱ需要經(jīng)過(guò)兩次離心，因此植酸酶Ⅰ屬于分泌蛋白。若植酸酶Ⅰ和Ⅱ的肽鏈組成不同，其差異體現(xiàn)在氨基酸的種類、數(shù)量和排列順序的不同。從圖的可看出，自變量可為溫度或pH，因變量可以通過(guò)測(cè)定單位時(shí)間內(nèi)植酸的降解量或植酸降解量產(chǎn)物的生成量來(lái)表示。（5）分析獲取植酸酶基因的流程圖可知，圖中基因組文庫(kù)大于cDNA文庫(kù)。B過(guò)程需要的酶應(yīng)該是逆轉(zhuǎn)錄酶，因?yàn)锳、C過(guò)程都能獲得含目的基因基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有 ，作為標(biāo)記基因。 （3）香蕉組織細(xì)胞具有 ，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中香蕉組織細(xì)胞的 。 【答案】 （1）PstⅠ、EcoRⅠ 含抗病基因的DNA 、質(zhì)粒 （2）抗卡那霉素基因 （3）全能性 脫分化、再分化 【解析】本題考查基因工程的有關(guān)知識(shí)。 （1）從圖可看出，只有PstⅠ、EcoRⅠ兩種酶能保持抗病基因結(jié)構(gòu)的完整性，所以構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ兩種酶，對(duì)抗病基因的DNA和質(zhì)粒進(jìn)行切割。 （2）卡那霉素能抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有抗卡那霉素基因，以此作為標(biāo)記基因。 （3）香蕉組織細(xì)胞具有全能性，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中香蕉組織細(xì)胞的脫分化和再分化。 8.（xx重慶卷）31.（16分）小鼠基因敲除技術(shù)獲得xx年諾貝爾獎(jiǎng)，該技術(shù)采用基因工程、細(xì)胞工程、雜交等手段使小鼠體內(nèi)的某一基因失去功能，以研究基因在生物個(gè)體發(fā)育和病理過(guò)程中的作用。例如現(xiàn)有基因型為BB的小鼠，要敲除基因B，可先用體外合成的突變基因b取代正?；駼，使BB細(xì)胞改變?yōu)锽b細(xì)胞，最終培育成為基因敲除小鼠。 （1）基因敲除過(guò)程中外源基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，可利用重組質(zhì)粒上的 檢測(cè)。如果被敲除的是小鼠抑癌基因，則可能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的 被激活，使小鼠細(xì)胞發(fā)生癌變。 （2）通過(guò)基因敲除，得到一只AABb小鼠。假設(shè)棕毛基因A、白毛基因a、褐齒基因B和黃齒基因b均位于常染色體上，現(xiàn)要得到白毛黃齒新類型小鼠，用來(lái)與AABb小鼠雜交的純合親本的基因型是 ，雜交子代的基因型是 。讓F1代中雙雜合基因型的雌雄小鼠相互交配，子代中帶有b基因個(gè)體的概率是 。不帶B基因個(gè)體的概率是 。 （3）在上述F1代中只考慮齒色這對(duì)性狀，假設(shè)這對(duì)性狀的遺傳屬X染色體伴性遺傳，則表現(xiàn)黃齒個(gè)體的性別是 ，這一代中具有這種性別的個(gè)體基因是 。 的基因型及比例為:1/4BB、2/4Bb、1/4bb，帶有b基因個(gè)體的概率是3/4，不帶B基因個(gè)體的概率是1/4。（只考慮B和b這一對(duì)基因的計(jì)算，用基因分離定律） 也可兩對(duì)同時(shí)計(jì)算用自由組合定律，AaBb自交得1/4AAX1/4BB、1/4AAX2/4Bb、1/4AAX１/4bb、2/4AaX1/4BB、2/4AaX2/4Bb、24AaX１/4bb、1/4aaX1/4BB、1/4aaX2/4Bb、1/4aaX１/4bb、可得帶有b基因個(gè)體的概率是12/16，不帶B基因個(gè)體的概率是4/16。 （3）假設(shè)齒色性狀的遺傳屬X染色體伴性遺傳，則親本都為褐齒，基因型為XBXb　和　XＢY，則F1代的基因型為XBXb、XＢXＢ、XBＹ、XbY，其中XbY為黃齒是雄性個(gè)體，雄性個(gè)體基因還有XBＹ?！　? 此題考查學(xué)生對(duì)兩大遺傳定律的理解與掌握情況及基因工程的有關(guān)知識(shí)?！　　? 9.（xx江蘇卷）34．（7分）蘇云金桿菌（Bt）能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是（2）圖中②表示 HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連接的過(guò)程，此過(guò)程可獲得 種重組質(zhì)粒；如果換用Bst l與BamHⅠ酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得 種重組質(zhì)粒。 （3）目的基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的 。 （4）圖中③的Ti質(zhì)粒調(diào)控合成的vir蛋白，可以協(xié)助帶有目的基因的T—DNA導(dǎo)人植物細(xì)胞，并防止植物細(xì)胞中 對(duì)T—DNA的降解。 （5）已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對(duì)人類的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞 。 （6）生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的 基因頻率的增長(zhǎng)速率。 【答案】 （1）4 （2）2 1 （3）復(fù)制 （4）DNA水解酶 （5）表面無(wú)相應(yīng)的特異性受體 （6）抗性 【解析】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)。（1）由于上述兩種酶形成的末端不一樣，所以被兩種不同的限制酶切割之后所形成的片段有AA、AB、BA、BB四種切法形成的四種片段。（A表示HindⅢ，B表示BamHⅠ）（2）同時(shí)被兩種限制酶切割有兩種不同的目的基因，即AB和BA，所以重組質(zhì)粒有兩種。Bst l與BamHⅠ酶切割的末端一樣，所以同時(shí)用這兩種限制酶切割只能形成一種目的基因，所以只能形成一種重組質(zhì)粒。（3）質(zhì)粒要進(jìn)行復(fù)制才能更多的表達(dá)出產(chǎn)物，所以重組之后要能復(fù)制。（4）酶具有專一性，對(duì)T—DNA的降解酶為DNA水解酶。（5）生物的細(xì)胞表面的受體具有特異性，人類腸上皮細(xì)胞沒(méi)有昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體。所以該毒素蛋白對(duì)人類的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較?。?）自然選擇是普遍存在的，純種種植自然選擇會(huì)使害蟲抗性基因頻率快速增長(zhǎng)。所以混合種植降低害蟲的抗性基因頻率的增長(zhǎng)速率。 10.（xx上海卷）37.（9分）人體細(xì)胞內(nèi)含有抑制癌癥發(fā)生的P53基因，生物技術(shù)可對(duì)此（4）如果某人的P53基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完全切割后，共出現(xiàn)170、220、290和460堿基對(duì)的四種片段，那么該人的基因型是________（以P+表示正常基因，Pn表示異常基因）。 【答案】 （1）從細(xì)胞中分離 通過(guò)化學(xué)方法人工合成 （2）見下圖 基因堿基對(duì)的替換（基因突變） （3）3 460 220 （4） 【解析】本題主要考查基因工程相關(guān)知識(shí)。 （1）目的基因的獲取方法有直接分離和化學(xué)方法人工合成兩種； （2）仔細(xì)對(duì)比正常人與患者的基因序列可知是CG堿基對(duì)變?yōu)榱薚A堿基對(duì)，這種變化屬于傳是細(xì)胞質(zhì)遺傳，兩個(gè)不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F1的表現(xiàn)型應(yīng)與母本一致，F(xiàn)1的遺傳物質(zhì)來(lái)自母本的多于來(lái)自父本的，因?yàn)槭芫阎械募?xì)胞質(zhì)幾乎全部來(lái)自母本。故C錯(cuò)誤。 12.（xx浙江卷）1．用動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是 A．都需用培養(yǎng)箱 B．都須用液體培養(yǎng)基 C．都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行 D．都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性 【答案】C 【解析】動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，動(dòng)物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基，不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，植物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)不一定用液體培養(yǎng)基，能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。故C正確。 13.（xx山東卷）35.（8分）（生物一現(xiàn)代生物科技專題） 人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過(guò)程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，且疾苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖： ② ① 提取 病毒 RNA DNA A基因 A基因 表達(dá)載體 受體 細(xì)胞 A蛋白 小鼠皮下 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 效應(yīng)B淋巴細(xì)胞 X 抗A蛋白的單克隆抗體 ③ 請(qǐng)回答： （1）過(guò)程①代表的是 。 （2）過(guò)程②構(gòu)建A基因表過(guò)載體時(shí)，必須使用 和 兩種工具酶。 （3）過(guò)程③采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是 ，獲得的X是 。 （4）對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)， 可選用圖中基因工程生產(chǎn)的 所制備的疫苗。 對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可以疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進(jìn)行 比較；或用圖中的 進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。 【答案】（1）逆轉(zhuǎn)錄 （2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶、限制性內(nèi)切酶） DNA連接酶（兩空可以互換） （3）細(xì)胞融合 雜交瘤細(xì)胞 （4） A蛋白 核酸（基因）序列 抗A蛋白的單克隆抗體 【解析】 本題以圖展示了疫苗的生產(chǎn)和單克隆抗體的制備的過(guò)程，考察了中心法則、基因工程、動(dòng)物細(xì)胞工程等現(xiàn)代生物科技。 （1）中心法則中，對(duì)于少數(shù)的以RNA為遺傳物質(zhì)的病毒，其遺傳信息的傳遞過(guò)程需要補(bǔ)充的過(guò)程有RNA的逆轉(zhuǎn)錄和RNA的復(fù)制的過(guò)程，圖中過(guò)程①正代表的是逆轉(zhuǎn)錄的過(guò)程 （2）基因工程的步驟是：目的基因的提取——構(gòu)建基因表達(dá)載體——導(dǎo)入受體細(xì)胞——目的基因的檢測(cè)和表達(dá)，其中構(gòu)建基因表達(dá)載體中需要限制酶來(lái)切割以獲取目的基因，同時(shí)需要相同的限制酶切割運(yùn)載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過(guò) DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體。 （3）過(guò)程③是將瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的過(guò)程，獲得的叫雜交瘤細(xì)胞，其具備了瘤細(xì)胞的無(wú)限增殖的特性和B淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生抗體的特性，從而制備單克隆抗體。 （4）本題考察了免疫預(yù)防的操作過(guò)程，以及欲確診疑似患者而采取的方法。本題中提示該RNA病毒表面的A蛋白為主要的抗原，故而可選用通過(guò)基因工程生產(chǎn)的A蛋白制備疫苗；確診時(shí)為判斷該病毒是否為題目中的RNA病毒，可以進(jìn)行核酸序列的比對(duì)，也可以利用單克隆抗體具備特異性，利用抗A蛋白的特異性單克隆抗體通過(guò)能否特異性結(jié)合判斷病毒表面是否有A蛋白的存在進(jìn)一步進(jìn)行檢測(cè)是否為目的RNA病毒。 14.（xx四川卷）30.（22分）回答下列Ⅰ、Ⅱ兩個(gè)小題。 Ⅰ.將小鼠胚胎干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化成一種特定的細(xì)胞（命名為M細(xì)胞），再將M細(xì)胞移植到糖尿病模型小鼠（胰島細(xì)胞被特定藥物破壞的小鼠）體內(nèi)，然后小鼠的血糖濃度，結(jié)果如圖所示（虛線表示正常小鼠的血糖濃度值）。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題： （1）實(shí)驗(yàn)用的胚胎干細(xì)胞取自小鼠的早期囊胚，取出胚胎后一般用 酶將其分散成單個(gè)細(xì)胞。 （2）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以判定M細(xì)胞已具有 細(xì)胞的功能。說(shuō)明判定的理由 。 （3）用胰島素基因片段做探針，對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞和M細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。請(qǐng)?jiān)谙卤淼目崭裰刑钌蠙z