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物質(zhì)的提取、分離和鑒定專題 【考試說明“生物知識內(nèi)容表”與此專題有關(guān)的實驗】 實 驗 要求 （1）檢測生物組織中還原糖和蛋白質(zhì) （2）葉綠體色素的提取和分離 （3）從生物材料中提取某些特定的成分 （4）蛋白質(zhì)的提取和分離 （5）DNA的粗提取與鑒定 掌握程度參考本考試大綱中的： 二、考試的能力要求 2.實驗與探究能力 一、物質(zhì)的提取、分離和鑒定實驗流程及方法 1.葉綠體色素的提取和分離 2.DNA粗提取和鑒定實驗 二、典型例題 1．以下有關(guān)生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)鑒定的實驗中，敘述錯誤 的是 A．紅色的西瓜汁是鑒定還原性糖的理想材料 B．花生子葉中脂肪的鑒定需要使用顯微鏡 C．用雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)不需要加熱 D．還原糖的鑒定需熱水浴才產(chǎn)生磚紅色沉淀 2．在葉綠體色素的提取和分離實驗中，收集到的濾液綠色過淺，其原因 可能是 ①未加石英砂、研磨不充分 ②一次加入大量的無水酒精提取 ③分次加入少量無水酒精提取 ④使用放置數(shù)天的菠菜葉 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④ 3.某研究組獲得了水稻的葉黃素缺失突變體。將其葉片進行了紅光照射光 吸收測定和色素層析條帶分析（從上至下），與正常葉片相比，實驗結(jié)果 是 A．光吸收差異顯著，色素帶缺第2條 B．光吸收差異不顯著，色素帶缺第2條 C．光吸收差異顯著，色素帶缺第3條 D．光吸收差異不顯著，色素帶缺第3條 4.中國的飲食講究“色香味”，顏色會影響消費。某同學(xué)擬研發(fā)“綠色” 食用色素，他以生長很快的入侵植物水葫蘆為材料進行如下實驗。根據(jù)所 學(xué)知識和實驗結(jié)果，請回答： I.提取葉綠素 （1）提取食用葉綠素的X應(yīng)該為 ，原因是 。 II.探究pH對葉綠素穩(wěn)定性的影響 取一些葉綠素粗產(chǎn)品，配成一定濃度的溶液，于室溫（約25℃）下進 行實驗，方法和結(jié)果如下表。 實驗組號 葉綠素溶液（mL） 調(diào)pH至 處理時間（min） 溶液顏色 ① 3.0 Y 10 綠色 ② 3.0 7.0 10 綠色 ③ 3.0 6.0 10 黃綠色 ④ 3.0 5.0 10 黃褐色 注：葉綠素被破壞后變成黃褐色。 （2）表中Y應(yīng)該為 ，原因是________________________ ____________________________________________。 （3）若用作食品色素，天然葉綠素色素不適用于 食品，否則 。 （4）該同學(xué)想了解葉綠素產(chǎn)品中是否含有其他色素，請你提供檢測方法并寫出主要步驟。 5．在利用雞血進行“DNA的粗提取與鑒定”的實驗中，相關(guān)敘述正確的是 A．用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L，濾去析出物 B．調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì) C．將絲狀物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍色 D．用菜花替代雞血作為實驗材料，其實驗操作步驟相同 6.某生物小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動。具體步驟如下： 材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份l0 g。剪碎后分 成兩組，一組置于20℃、另一組置于-20℃條件下保存24 h。 DNA粗提?。? 第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入15mL研磨液，充分研磨。 用兩層紗布過濾。取濾液備用。 第二步：先向6個小燒杯中分別注入10mL濾液，再加入20 mL體積分?jǐn)?shù) 為95％的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物 纏繞在玻璃棒上。 第三步：取6支試管，分別加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀 物。 DNA檢測：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝?，置于沸水 中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如下表。 材料保存溫度 花菜 辣椒 蒜黃 20℃ + + + + + + -20℃ + + + + + + + + + 分析上述實驗過程，回答下列問題： ⑴該探究性實驗課題名稱是 。 ⑵第二步中”緩緩地”攪拌，這是為了減少 。 ⑶根據(jù)實驗結(jié)果，得出結(jié)論并分析。 ①結(jié)論1：與20℃相比，相同實驗材料在-20℃條件下保存，DNA的提取 量較多。 結(jié)論2： 。 ②針對結(jié)論1請?zhí)岢龊侠淼慕忉專? 。 DNA粗提?。? 第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入15mL研磨液，充分研磨。 用兩層紗布過濾。取濾液備用。 第二步：先向6個小燒杯中分別注入10mL濾液，再加入20 mL體積分?jǐn)?shù) 為95％的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物 纏繞在玻璃棒上。 第三步：取6支試管，分別加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀 物。 DNA檢測：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝?，置于沸水 中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如下表。 ⑷氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對 DNA影響極小。為了進一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性．在DNA粗提 取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是： 。然后用體積分?jǐn)?shù)為95％ 的冷酒精溶液使DNA析出。 7．某生物小組研究蘿卜貯藏根組織細胞中是否存在蛋白質(zhì)和DNA。他們從 查閱資料得知：①蛋白質(zhì)在10%NaCl溶液中可沉淀析出；②在蛋白質(zhì)溶液 中，加入雙縮脲試劑，溶液呈現(xiàn)特有的顏色；③DNA溶于10%NaCl溶液但 在95%酒精中呈白色絮狀沉淀，析出；④DNA可以被甲基綠染液染成藍綠 色 實驗材料和實驗用具：略 藥品及試劑：蒸餾水、10％NaCl溶液、95%酒精、甲基綠染液、雙縮脲試 劑、蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)樣品。 請你根據(jù)所提供的條件完善實驗方案。 一、材料處理：稱取50g蘿卜冼凈切塊，加水30ml，粉碎機粉碎，將勻漿 經(jīng)紗布過濾。 二、提?。? ⑴提取蛋白質(zhì)：向經(jīng)紗布過濾得到的濾液中加入 ， 直至 。經(jīng)濾紙過濾，將 放入試管中，加入1ml蒸餾水，振蕩，用于蛋白質(zhì)鑒定。 ⑵提取DNA：向除去 的濾液中，加入 ， 用玻棒輕輕攪拌，見有 產(chǎn)生，經(jīng)濾紙過濾，用 鑷子將 置于載玻片，用于DNA鑒定。 三、鑒定及結(jié)果： ⑴在用于蛋白質(zhì)鑒定的實驗試管中，加入 ，產(chǎn)生 色反應(yīng)；同時將 和1ml蒸餾水 放入另一試管，也加相同的試劑作為對照實驗。觀察到___________ _________________，說明實驗試管中有蛋白質(zhì)存在。 ⑵在用于DNA鑒定的載玻片上，滴加 ，呈現(xiàn) ，說明該白色絮狀沉淀為DNA。 ⑶通過對白蘿卜貯藏根勻漿液的檢測，說明有____________ 的存在。 四、討論： ⑴蛋白質(zhì)在蘿卜貯藏根組織細胞中所起的作用有__________ ___________________________________________________。 ⑵ DNA主要來自蘿卜貯藏根組織細胞的______________ 8.請回答下列與實驗室提取芳香油有關(guān)的問題： ⑴植物芳香油的提取可采用的方法有萃取法、_____和_______。 ⑵芳香油溶解性的特點是不溶于___，易溶于________，因此可用_______ __作為提取劑來提取芳香油。 ⑶橘子果實含有芳香油，通常選用新鮮_______作為材料提取芳香油，原 因是_______________________________。 ⑷對材料壓榨后可得到糊狀液體，為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用 的方法是________。 ⑸用水蒸汽蒸餾法提取芳香油時，在油水混合物中加入氯化鈉并放置一段 時間后，芳香油將分布于液體的_____層，原因是____________________。 加入氯化鈉的作用是_____________________________________。常用于 分離油層和水層的器皿是________。分離出的油層中加入無水硫酸鈉的作 用是________________________________。 ⑹用蒸餾法提取芳香油過程中，加熱時需安裝冷凝回流裝置，其目的是__________________________________。 ⑺當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時，蒸餾過程中，影響芳香油提取量的主 要因素有蒸餾時間和 。當(dāng)原料量等其他條件一定時， 提取量隨蒸餾時間的變化趨勢是____________________________________ ______________________________________。 ⑻密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰精油保存時最好存放在溫度 的地方，目 的是 。 ⑼某植物花中精油的相對含量隨花的不同生長發(fā)育時期的變化趨勢如下圖 所示。提取精油時采摘花的最合適時間為 天左右。