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第二章 克隆技術(shù) 一、單選題 1.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合后，要篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是 (　　)。 ①B淋巴細(xì)胞?、谛∈蠊撬枇黾?xì)胞?、跙淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞　④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞?、蓦s交瘤細(xì)胞 A.①②③④ B.①③⑤ C.②④ D.②③ 2.如果用動物的細(xì)胞進(jìn)行克隆實(shí)驗(yàn)應(yīng)該選擇的細(xì)胞核不能來源于（ ） A.乳腺細(xì)胞 B.卵細(xì)胞 C.胃腺細(xì)胞 D.胚胎時期的胚胎細(xì)胞 3.如圖為克隆牛（名為如意）的培育過程。下列有關(guān)敘述正確的是（ ） A.如意的表現(xiàn)型和B牛相同 B.如意的產(chǎn)生過程為有性生殖 C.試管嬰兒的操作過程和克隆牛的不完全相同 D.可用A牛的精子代替B牛的卵細(xì)胞 4.如圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程，有關(guān)敘述不正確的是（　　） A.圖中實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原 B.在培養(yǎng)液中加入促融劑誘導(dǎo)細(xì)胞融合才能獲得乙 C.用特定的選擇培養(yǎng)基對乙篩選，能增殖的均為融合細(xì)胞 D.丙需進(jìn)行大規(guī)模體外培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁 5.下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，其中1過程注射的物質(zhì)和A細(xì)胞的名稱分別為( ) A.抗體、T淋巴細(xì)胞 B.抗原、T淋巴細(xì)胞 C.抗體、B淋巴細(xì)胞 D.抗原、B淋巴細(xì)胞 6.下列關(guān)于體細(xì)胞克隆的敘述中，錯誤的是(　　) A.供體為體細(xì)胞的細(xì)胞核 B.受體為去核卵母細(xì)胞 C.細(xì)胞核移植是體細(xì)胞克隆的關(guān)鍵步驟 D.克隆出的后代與供體的遺傳物質(zhì)和表現(xiàn)型完全一致 7.下圖是科學(xué)家新研發(fā)的制備單克隆抗體的過程，相關(guān)敘述錯誤的是(　　) A.該過程涉及基因工程和動物細(xì)胞融合技術(shù) B.經(jīng)酶A處理后的Ⅰ與質(zhì)粒具有相同的黏性末端 C.若供體DNA提供了prG基因(無限增殖調(diào)控基因)，則該過程中的Ⅱ是已免疫的B淋巴細(xì)胞 D.通過檢測和篩選得到的Ⅲ細(xì)胞既能無限增殖又能分泌特異性抗體 8.下列關(guān)于克隆的敘述，不正確的一項(xiàng)是（　?。? A.生物體通過體細(xì)胞進(jìn)行的無性繁殖 B.將某腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個細(xì)胞系 C.扦插和嫁接實(shí)質(zhì)上也是克隆 D.將雞的某個DNA片段整合到小鼠的DNA中 9.隨著生物技術(shù)的迅速發(fā)展，已滅絕生物的“復(fù)活”將不再是神話。如果世界上最后一只野驢剛剛死亡，下列“復(fù)活”野驢的方法中，最可行的是 A.將野驢的體細(xì)胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分化、再分化，培育成新個體 B.取出野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個體 C.取出野驢的體細(xì)胞核移植到家驢的去核卵母細(xì)胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個體 D.將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成新個體 10.牛雄性胚胎中存在特異性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H-Y單克隆抗體，篩選胚胎進(jìn)行移植，以利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。下列相關(guān)敘述正確的是（ ） A.此過程利用了動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) B.H-Y單克隆抗體由骨髄瘤細(xì)胞分泌 C.培養(yǎng)鑒別后的雄性胚胎用于生產(chǎn)藥物 D.目的基因與含有血紅蛋白基因的啟動子的載體連接 11.下列關(guān)于單克隆抗體的應(yīng)用敘述錯誤的是( ) A.特異性強(qiáng)、靈敏度高；與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈” B.制備單克隆抗體是動物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的應(yīng)用 C.體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體 D.由效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌 12.科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體。與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞是(　　) A.經(jīng)過特定抗原免疫的B淋巴細(xì)胞 B.不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 C.經(jīng)過特定抗原免疫的T淋巴細(xì)胞 D.不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 13.用動物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯誤的是（） A.將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞 B.用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞 C.用聚乙二醇（PEG）作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合 D.篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體 二、填空題 14.如圖表示人類“治療性克隆”的大概過程，請據(jù)圖回答： （1）人類“治療性克隆”屬于生物工程中的________工程，它是一種________水平的操作． （2）科學(xué)家將患者的體細(xì)胞的核植入去核的卵細(xì)胞，而不直接用體細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的原因是：________ （3）你認(rèn)為“治療性克隆”有什么意義？（答出兩點(diǎn)）________ ， ________． （4）胚胎干細(xì)胞若作為培育轉(zhuǎn)基因動物的受體細(xì)胞被移入囊胚中，胚胎將發(fā)育成只有部分細(xì)胞含有目的基因的“嵌合體”．這種嵌合體的后代仍然會含有目的基因嗎？________．原因是________． （5）在胚胎工程中，可以利用連續(xù)胚胎細(xì)胞核移植的方式培育動物，該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是________ 15.人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷．圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，請分析回答： （1）制備單克隆抗體過程中要用到________和________技術(shù)． （2）在B淋巴細(xì)胞內(nèi)DNA合成有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤所阻斷．而骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成沒有S途徑．利用DNA合成途徑不同的特點(diǎn)配制的HAT培養(yǎng)基含有多種成分，其中添加的________成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用．最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是________ （3）哺乳動物在懷孕初期能為胚胎的收集提供可能，這是因?yàn)開_______；在胚胎移植技術(shù)中收集到胚胎后要進(jìn)行________以及移植后的檢查等步驟；胚胎移植時可利用激素對受體進(jìn)行________處理，使受體處于適合的生理狀況；此外，受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生________反應(yīng)，為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能． 16.新興生物工程能使免疫學(xué)在應(yīng)用方面更上一層樓，為人類帶來福音．一方面新興生物工程可以為免疫活性物質(zhì)及疫苗的制備開辟新途徑，解決免疫治療及免疫預(yù)防方面的難題；另一方面，新興生物工程還可以為解決器官移植所面臨的供體不足和免疫排斥兩大難題提供可能． （1）利用________技術(shù)發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為制備單克隆抗體開辟了新途徑，與傳統(tǒng)方法獲取的同類產(chǎn)品相比，它的顯著優(yōu)點(diǎn)是________ （2）干擾素及部分疫苗都可以通過________技術(shù)制造的工程菌來大規(guī)模生產(chǎn)，如國內(nèi)應(yīng)用較普遍的重組CHO乙肝疫苗； （3）對大面積燒傷病人，借助________技術(shù)可獲取大量自身健康皮膚用于移植． （4）通過向供體動物基因組中導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制________的表達(dá)，或設(shè)法將之去除，再結(jié)合________技術(shù)，可培育出無免疫排斥的轉(zhuǎn)基因豬器官； （5）________的分離和培養(yǎng)成功也為解決上述難題開辟了新途徑，因其具有________性，可在體外誘導(dǎo)分化產(chǎn)生各種人造組織器官． 三、實(shí)驗(yàn)探究題 17.Graves?。℅D）可導(dǎo)致甲狀腺功能亢進(jìn)。研究發(fā)現(xiàn)，GD患者甲狀腺細(xì)胞表面表達(dá)大量細(xì)胞間粘附分子1（ICAM-1），導(dǎo)致甲狀腺腫大。科研人員通過制備單克隆抗體，對治療GD進(jìn)行了嘗試。 （1）用ICAM-1作為抗原間隔多次免疫若干只小鼠，幾周后取這些免疫小鼠的血清，分別加入多孔培養(yǎng)板的不同孔中，多孔培養(yǎng)板中需加入________以檢測這些小鼠產(chǎn)生的抗體。依據(jù)反應(yīng)結(jié)果，選出________反應(yīng)最強(qiáng)的培養(yǎng)孔所對應(yīng)的小鼠M。 （2）實(shí)驗(yàn)用骨髓瘤細(xì)胞置于________恒溫培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)，融合前將部分培養(yǎng)細(xì)胞置于含HAT的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后培養(yǎng)基中________（填“有”或“無”）骨髓瘤細(xì)胞生長，說明培養(yǎng)基符合實(shí)驗(yàn)要求。 （3）取小鼠M的脾臟細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液，與實(shí)驗(yàn)用骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有________能力的細(xì)胞。將獲得的上述細(xì)胞在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，用ICAM-1檢測，從中選擇________的雜交瘤細(xì)胞，植入小鼠腹腔中________培養(yǎng)，一段時間后從小鼠腹水中提取實(shí)驗(yàn)用抗體。 （4）若進(jìn)一步比較實(shí)驗(yàn)用抗體和131I對GD模型小鼠的治療作用，可將若干GD模型小鼠等分為三組，請補(bǔ)充下表中的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。 對照組（A） 131I治療組（B） 單克隆抗體治療組（C） 給GD模型小鼠腹腔注射0.1mL無菌生理鹽水 給GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL無菌生理鹽水的131I ________ 四、綜合題 18.下圖是某實(shí)驗(yàn)室做的通過動物纖維母細(xì)胞等獲得單抗的實(shí)驗(yàn)研究。據(jù)圖回答相關(guān)問題。 （1）X、Y、Z細(xì)胞的的名稱分別是________、________、________。 （2）①過程類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的________過程。與纖維母細(xì)胞相比，誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較________。②過程的實(shí)質(zhì)是________。 （3）X細(xì)胞和Y細(xì)胞經(jīng)過促融合處理后可得到________種細(xì)胞 19.單純皰疹病毒I 型(HSVI)可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HSVI 的單克隆抗體可快速檢測HSVI?；卮鹣铝袉栴}： （1）在制備抗HSVI 的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的HSVI 蛋白，一段時間后，若小鼠血清中抗________的抗體檢測呈陽性，說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了________反應(yīng)，再從小鼠的________中獲取B 淋巴細(xì)胞。將該B 淋巴細(xì)胞與小鼠的________細(xì)胞融合，再經(jīng)過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞具有的特點(diǎn)是________。 （2）若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的________中使其增殖，再從________中提取、純化獲得。 （3）通過上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識別這種HSVI 蛋白，其原因是該抗體具有________和________等特性。  答案解析部分 一、單選題 1.【答案】A 【解析】【分析】B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體，在體外不能無限增殖；骨髓瘤細(xì)胞不產(chǎn)生專一性抗體，在體外能無限增殖。所以B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞在體外也不能存活增殖，而雜交瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞在體外能存活增殖。用特定的培養(yǎng)基可以選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制，所以骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞在這種特定的培養(yǎng)基上不能存活繁殖。故選A 2.【答案】B 【解析】【解答】解：1、乳腺細(xì)胞、胃腺細(xì)胞和胚胎時期的胚胎細(xì)胞都含有2個染色體組，經(jīng)過核移植獲得克隆動物．2、卵細(xì)胞只含有1個染色體組，核移植后獲得單倍體，對于絕大多數(shù)二倍體動物而言，單倍體不能存活． 故選：B． 【分析】動物核移植的概念：將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體（克隆動物）． 3.【答案】C 【解析】【解答】分析過程圖可知，如意的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來自于A牛，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自于B牛，生物的表現(xiàn)型由細(xì)胞核內(nèi)遺傳物質(zhì)和細(xì)胞質(zhì)中遺傳物質(zhì)共同控制，并受環(huán)境條件的影響，因此如意的表現(xiàn)型和A牛、B牛都不完全相同，A不符合題意；圖中顯示，如意的產(chǎn)生是動物體細(xì)胞移植的結(jié)果，其過程應(yīng)為無性生殖，B不符合題意；試管嬰兒的誕生應(yīng)用了體外受精、早期胚胎培養(yǎng)及胚胎移植等技術(shù)，其操作過程和克隆牛的不完全相同，C符合題意；與A牛的精子相比，B牛的卵細(xì)胞中含有細(xì)胞核遺傳物質(zhì)表達(dá)所需的成分，同時卵細(xì)胞體積大，所含的營養(yǎng)物質(zhì)（卵黃）多，因此不能用A牛的精子代替B牛的卵細(xì)胞，D不符合題意。 故答案為：C 【分析】特別提醒 (1)核移植時選MⅡ期卵母細(xì)胞的原因有：①此類細(xì)胞體積大，易于操作；②卵黃多，可為發(fā)育提供充足的營養(yǎng)；③卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中存在激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。 (2)克隆動物是由重組細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)而來的，該重組細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體細(xì)胞，細(xì)胞核基因來源于供體細(xì)胞的細(xì)胞核，所以克隆動物絕大部分性狀與供體動物相同，少數(shù)性狀與提供卵母細(xì)胞的動物相同，與代孕動物的性狀無遺傳關(guān)系。 (3)動物體細(xì)胞核移植技術(shù)(克隆)從生殖方式的角度看屬于無性生殖，需要動物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎工程技術(shù)的支持。 4.【答案】C 【解析】【解答】解：A、甲注射小鼠，產(chǎn)生能分泌特異性抗體的B淋巴細(xì)胞，則甲屬于抗原，A正確； B、利用聚乙二醇（化學(xué)法）、滅活的病毒（生物法）和電激（物理法）可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得雜種細(xì)胞，B正確； C、用特定的選擇培養(yǎng)基對乙篩選，融合具有同種核的細(xì)胞和未融合細(xì)胞均不能生長，只有融合的雜種細(xì)胞能生長，C錯誤； D、雜交瘤細(xì)胞經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選并經(jīng)單一抗體檢測后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞即可制備單克隆抗體，D正確． 故選：C． 【分析】據(jù)圖分析，甲表示抗原，乙表示雜種細(xì)胞，表示雜交瘤細(xì)胞，丁表示能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞． 單克隆抗體的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．兩次抗體檢測：專一抗體檢驗(yàn)陽性． 5.【答案】D 【解析】【解答】分析圖形可知，圖中1過程注射的是特定抗原，以獲得經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞，用于和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，生產(chǎn)單克隆抗體，D正確?！痉治觥勘绢}考查單克隆抗體制備過程，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)的能力。 6.【答案】D 【解析】【分析】克隆出的后代與供體的細(xì)胞核內(nèi)的遺傳物質(zhì)一致但由于細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)的影響還有環(huán)境的影響表現(xiàn)型不完全一致，D錯誤，ABC的敘述正確，本題選D。 【點(diǎn)評】本題考查了學(xué)生的理解分析能力，難度適中，解題的關(guān)鍵是明確體細(xì)胞克隆的過程。 7.【答案】A 【解析】【解答】由圖可知，該過程涉及基因工程，但未涉及動物細(xì)胞融合技術(shù)。該過程是把控制抗體產(chǎn)生的基因?qū)牍撬枇黾?xì)胞或把無限增殖調(diào)控基因?qū)胍衙庖叩腂細(xì)胞進(jìn)而制取單克隆抗體的。故答案為：A 【分析】分析題圖，用同一種限制性內(nèi)切酶（酶A）處理供體DNA和質(zhì)粒，產(chǎn)生相同的黏性末端，用DNA連接酶（酶B）處理產(chǎn)生重組質(zhì)粒，導(dǎo)入效應(yīng)B細(xì)胞（Ⅱ細(xì)胞）產(chǎn)生重組細(xì)胞Ⅲ。 8.【答案】D 【解析】【解答】A、物體通過體細(xì)胞進(jìn)行的無性繁殖即克隆，A正確； B、某腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)繁殖是由一祖先細(xì)胞分裂繁殖成一團(tuán)細(xì)胞的過程，屬于無性繁殖，因此屬于克隆，B正確； C、扦插和嫁接屬于無性繁殖，能保持親本的遺傳性狀，屬于個體水平的克隆，C正確； D、將雞的某個DNA片段整合到小鼠的DNA中屬于轉(zhuǎn)基因技術(shù)，D錯誤． 故選：D． 【分析】克隆是指生物體通過體細(xì)胞進(jìn)行的無性繁殖，以及由無性繁殖形成的基因型完全相同的后代個體組成的種群．通常是利用生物技術(shù)由無性生殖產(chǎn)生與原個體有完全相同基因組織后代的過程．不經(jīng)過兩性細(xì)胞結(jié)合而直接繁衍后代，就叫無性繁殖，也稱克?。? 9.【答案】C 【解析】【分析】此時應(yīng)該選擇克隆的方法，利用細(xì)胞核移植技術(shù)，使野驢“復(fù)活”，因?yàn)閯游锛?xì)胞的全能性受到限制，而細(xì)胞核具有全能性，故本題答案選C。 10.【答案】A 【解析】【解答】此過程利用了動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等，A符合題意；H-Y單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞分泌，B不符合題意；由于是利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥，則鑒別后的雌性胚胎可用于生產(chǎn)藥物，而雄性胚胎沒有意義，C不符合題意；本題沒有涉及到基因工程以及目的基因的種類等，D不符合題意。 故答案為：A 【分析】理清單克隆抗體制備的過程： 11.【答案】C 【解析】【解答】單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，同時單克隆抗體的應(yīng)用之一就是制成生物導(dǎo)彈，故A正確；單克隆抗體制備的原理是動物細(xì)胞融合，故B正確；單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞分泌的，故C錯誤，D正確。【分析】本題主要考查單克隆抗體的制備及應(yīng)用，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。 12.【答案】A 【解析】【解答】骨髓瘤細(xì)胞必須與經(jīng)過特定抗原免疫的B淋巴細(xì)胞融合，形成雜交瘤細(xì)胞，才能大量增殖并產(chǎn)生能夠與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合的單克隆抗體。故答案為：A 【分析】B淋巴細(xì)胞要經(jīng)過免疫過程，即接觸抗原，增殖分化為有特異性免疫功能的B淋巴細(xì)胞，才能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，所以，與骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞實(shí)際上是漿細(xì)胞。 13.【答案】B 【解析】【分析】 A.將特定的抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞；正確。 B.纖維素酶是用來處理細(xì)胞壁的，而動物細(xì)胞不含細(xì)胞壁；處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞用胰蛋白酶；錯誤。 C.用聚乙二醇（PEG）作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合；正確。 D.篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群，既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，培養(yǎng)后提取單克隆抗體；正確。 【點(diǎn)評】本題考查了動物細(xì)胞工程的知識，提升學(xué)生理解能力和分析與綜合運(yùn)用能力。 二、填空題 14.【答案】細(xì)胞；細(xì)胞；體細(xì)胞核在體細(xì)胞中不能表現(xiàn)全能性，而卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可以給它提供表達(dá)全能性的環(huán)境；為人類疾病治療提供了新的途徑；再造人體組織或器官供移植；沒有排斥反應(yīng)；不一定；嵌合體的生殖細(xì)胞中不一定含有目的基因；后代完全保留了親代的遺傳性，并可無限度地獲得遺傳性狀完全相同的后代 【解析】【解答】（1）人類“治療性克隆”涉及核移植技術(shù)和動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，屬于細(xì)胞工程，是一種細(xì)胞水平的操作． （2）將患者的體細(xì)胞的核植入去核的卵細(xì)胞，而不直接用體細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，原因是體細(xì)胞核在體細(xì)胞中不能表現(xiàn)全能性，而卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可以給它提供表達(dá)全能性的環(huán)境． （3）“治療性克隆”為人類疾病治療提供了新的途徑，再造人體組織或器官供移植；沒有排斥反應(yīng)． （4）只有部分細(xì)胞含有目的基因的“嵌合體”，形成的生殖細(xì)胞中不一定含有目的基因，因此這種嵌合體的后代不一定含有目的基因． （5）利用連續(xù)胚胎細(xì)胞核移植的方式培育動物，優(yōu)點(diǎn)是后代完全保留了親代的遺傳性，并可無限度地獲得遺傳性狀完全相同的后代． 【分析】分析題圖：圖示所示為人類“治療性克隆”的大概過程，從患者身體上提取一個體細(xì)胞核，移植到去核的卵細(xì)胞，形成重組細(xì)胞，形成胚胎干細(xì)胞，分裂分化形成各種組織和器官，供患者本人移植用． 15.【答案】動物細(xì)胞培養(yǎng)　；動物細(xì)胞融合；氨基嘌呤；能無限增殖并分泌特異性抗體；早期胚胎在一定時間內(nèi)不會與母體子宮建立組織上的聯(lián)系，而是處于游離狀態(tài)；檢查，培養(yǎng)或保存；同期發(fā)情；免疫排斥 【解析】【解答】解：（1）制備單克隆抗體的過程涉及到動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞培養(yǎng)兩個過程． （2） 根據(jù)題意可知，在培養(yǎng)基中添加氨基嘌呤后，可以阻斷DNA復(fù)制的主要途徑，又因?yàn)楣撬枇黾?xì)胞的DNA合成沒有輔助途徑，因此在此培養(yǎng)基中選擇生存下來的細(xì)胞只有融合后的雜交瘤細(xì)胞，因?yàn)橹挥须s交細(xì)胞才能進(jìn)行輔助途徑進(jìn)行DNA復(fù)制并分裂增殖．雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是能無限增殖并分泌特異性抗體． （3） 哺乳動物的早期胚胎形成后，在一定時間內(nèi)處于游離狀態(tài)，沒有與母體子宮建立組織上的聯(lián)系，這樣為胚胎的收集提供了可能．在胚胎移植技術(shù)中，收集到胚胎后要 先進(jìn)行檢查、培養(yǎng)或保存，然后再進(jìn)行移植，以及移植后的檢查等步驟．胚胎移植時可利用激素對受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，使受體處于適合的生理狀況；此外，受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥，為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能． 【分析】1、單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體． 2、 胚胎移植的生理基礎(chǔ)：（1）供體與受體相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境；（2）胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能；（3）子宮不對外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能．（4）胚胎遺傳性狀不受受體任何影響． 16.【答案】細(xì)胞融合 ；特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備（產(chǎn)量高）；轉(zhuǎn)基因（基因工程）；動物細(xì)胞培養(yǎng)；抗原決定基因；克??；胚胎干細(xì)胞；全能性 【解析】【解答】（1）利用細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為制備單克隆抗體開辟了新途徑．單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備（產(chǎn)量高）． （2）工程菌是基因工程中常用的受體細(xì)胞． （3）大面積燒傷的病人們可以采用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得大量自身健康皮膚進(jìn)行移植． （4）利用基因工程獲得無免疫排斥的轉(zhuǎn)基因豬器官，可以向動物基因組中加入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定簇基因，再結(jié)合克隆技術(shù)獲得基因個體． （5）胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育全能性，可以在體外分化成各種組織由于器官移植． 【分析】利用細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為制備單克隆抗體開辟了新途徑．單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備（產(chǎn)量高）； 工程菌是基因工程中常用的受體細(xì)胞；大面積燒傷的病人們可以采用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得大量自身健康皮膚進(jìn)行移植；利用基因工程獲得無免疫排斥的轉(zhuǎn)基因豬器 官，可以向動物基因組中加入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定簇基因，再結(jié)合克隆技術(shù)獲得基因個體；胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育全能性，可以在體外分化成各種組織由于器官移植． 三、實(shí)驗(yàn)探究題 17.【答案】（1）ICAM-1；陽性（或“抗原-抗體”） （2）（5%）CO2；無 （3）無限增殖；大量產(chǎn)生抗ICAM-1抗體；克隆 （4）給GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL無菌生理鹽水的抗ICAM-1單克隆抗體 【解析】【解答】解：（1）用ICAM﹣1作為抗原間隔多次免疫若干只小鼠，幾周后取這些免疫小鼠的血清，分別加入多孔培養(yǎng)板的不同孔中，多孔培養(yǎng)板中需加入ICAM﹣1以檢測這些小鼠產(chǎn)生的抗體．依據(jù)反應(yīng)結(jié)果，選出陽性（或“抗原﹣抗體”）反應(yīng)最強(qiáng)的培養(yǎng)孔所對應(yīng)的小鼠M．（2）實(shí)驗(yàn)用骨髓瘤細(xì)胞置于（5%）CO2恒溫培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)，融合前將部分培養(yǎng)細(xì)胞置于含HAT的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后培養(yǎng)基中無骨髓瘤細(xì)胞生長，說明培養(yǎng)基符合實(shí)驗(yàn)要求．（3）取小鼠M的脾臟細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液，與實(shí)驗(yàn)用骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有無限增殖能力的細(xì)胞．將獲得的上述細(xì)胞在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，用ICAM﹣1檢測，從中選擇大量產(chǎn)生抗ICAM﹣1 抗體的雜交瘤細(xì)胞，植入小鼠腹腔中克隆培養(yǎng)，一段時間后從小鼠腹水中提取實(shí)驗(yàn)用抗體．（4）根據(jù)題干中實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹氨容^實(shí)驗(yàn)用抗體和131I對GD 模型小鼠的治療作用”，單克隆抗體治療組（C）中應(yīng)給GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL無菌生理鹽水的抗ICAM﹣1單克隆抗體． 【分析】理清單克隆抗體的制備過程 四、綜合題 18.【答案】（1）骨髓瘤細(xì)胞；抗原刺激過的B細(xì)胞（漿細(xì)胞）；雜交瘤細(xì)胞 （2）脫分化；高；基因的選擇性表達(dá) （3）5 【解析】【解答】⑴在單克隆抗體制備的過程中，將骨髓瘤細(xì)胞和特定的漿細(xì)胞融合，形成雜交瘤細(xì)胞，最后經(jīng)過培養(yǎng)獲得單克隆抗體，因此X細(xì)胞是骨髓瘤細(xì)胞，Y細(xì)胞是特定的漿細(xì)胞，Z細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞。⑵誘導(dǎo)纖維母細(xì)胞變成干細(xì)胞的過程相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化過程；干細(xì)胞的分裂能力強(qiáng)，因此其全能性比纖維母細(xì)胞高；過程②是細(xì)胞分化，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。⑶在誘導(dǎo)細(xì)胞融合時，可能融合，也可能沒有融合，因此能獲得5種細(xì)胞；雜交瘤細(xì)胞經(jīng)過篩選的目的是帥選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞?！痉治觥勘绢}主要考查單克隆抗體的制備，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)和識圖、圖文轉(zhuǎn)化的能力。 19.【答案】（1）HSV1蛋白；體液免疫；脾臟(其他合理答案也可)；骨髓瘤；能無限增殖且可產(chǎn)生專一抗體(其他合理答案也可) （2）腹腔；腹水　 （3）靈敏度高；特異性強(qiáng)(其他合理答案也可) 【解析】【解答】(1)單克隆抗體制備的第一步是免疫處理。先給小鼠注射一種純化的HSV1 蛋白，一段時間后，若小鼠血清中抗HSV1 蛋白的抗體檢測呈陽性，說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了體液免疫反應(yīng)。第二步制備雜交瘤細(xì)胞。從小鼠的淋巴器官中(如脾，骨髓，扁桃體，胸腺等)獲取B 淋巴細(xì)胞，與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)過篩選檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生專一性抗體。(2)若想獲得大量單克隆抗體，通常有兩種方法：一是將雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)在動物細(xì)胞培養(yǎng)液中，然后從動物細(xì)胞培養(yǎng)液中分離出單克隆抗體；二則是將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖，然后從小鼠的腹水中提取純化獲得。(3)單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高等特點(diǎn)?！痉治觥繂慰寺】贵w：由一個B淋巴細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群所產(chǎn)生的單一型抗體分子。 制備原理：免疫原理，細(xì)胞融合原理和動物細(xì)胞培養(yǎng)原理 優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并能大量制備。 由小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體。