《高考生物一輪復(fù)習(xí)第二講《微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用》課件（新人教版選修1）》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《高考生物一輪復(fù)習(xí)第二講《微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用》課件（新人教版選修1）（64頁珍藏版）》請?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

歡迎進(jìn)入生物課堂 選修一 高考成功方案第1步 高考成功方案第2步 高考成功方案第3步 第二講 一 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1 培養(yǎng)基 1 培養(yǎng)基即人們按照 配制出供其生長繁殖的基質(zhì) 2 按物理狀態(tài) 可將培養(yǎng)基劃分為培養(yǎng)基和培養(yǎng)基 如瓊脂培養(yǎng)基 3 培養(yǎng)基一般都含有的成分是 在此基礎(chǔ)上還需滿足微生物生長對的需求 微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求 液體 固體 水 碳源 氮源和無機(jī)鹽 pH 特殊營養(yǎng)物質(zhì) 及氧氣 2 消毒和滅菌 較為溫和 強(qiáng)烈 一部分對人體有害的微生物 不包括芽孢和孢子 所有的微生物 包括芽孢和孢子 煮沸 巴氏 灼燒 干熱 高壓蒸汽 3 大腸桿菌純化及菌種保藏 1 制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的步驟為 稱量 溶化 2 微生物純化的原理及方法 原理 在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成 使其長成單個(gè)的菌落 這個(gè)菌落就是一個(gè)純化的細(xì)菌菌落 方法 要求無菌操作 計(jì)算 滅菌 固體 單個(gè)細(xì)胞 倒平板 平板劃線法 稀釋涂布平板法 3 菌種保藏 短期保存 上4 保藏 缺點(diǎn)是菌種易被污染或產(chǎn)生變異 長期保存 采用 20 冷凍箱中保藏 固體斜面培養(yǎng)基 甘油管藏法 二 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 1 分離原理 土壤中細(xì)菌之所以能分解尿素 是由于它們能合成 這種物質(zhì)在把尿素分解成無機(jī)物的過程中起作用 使用以為唯一氮源的培養(yǎng)基能促進(jìn)的細(xì)菌的生長和繁殖 并抑制或阻止其他微生物的生長 從而分離出目的菌 脲酶 催化 尿素 分解尿素 2 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用 3 實(shí)驗(yàn)流程 土壤取樣 微生物的培養(yǎng)與觀察 細(xì)菌的計(jì)數(shù) 稀釋涂布 平板法 制備培養(yǎng)基 三 分解纖維素的微生物的分離1 纖維素酶的組成及作用 1 組成 一種酶 它至少包括三種組分 即 2 作用 復(fù)合 C1酶 Cx酶和葡萄糖苷酶 纖維二糖葡萄糖 2 篩選方法 1 方法 法 即通過是否產(chǎn)生來篩選纖維素分解菌 2 培養(yǎng)基 是以為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基 3 篩選流程土壤取樣 將樣品涂布到的培養(yǎng)基上 挑選的菌落 剛果紅染色 透明圈 纖維素粉 選擇培養(yǎng) 梯度稀釋 鑒別纖維素分解菌 產(chǎn)生透明圈 做一題 例1 如下所示為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基的配方 請回答 1 依物理狀態(tài) 該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基 依用途劃分 則屬于 培養(yǎng)基 2 根據(jù)培養(yǎng)基的配方可判斷出 該培養(yǎng)基所培養(yǎng)微生物的同化作用的類型是 培養(yǎng)的微生物可能是 3 該培養(yǎng)基中的碳源是 不論何種培養(yǎng)基 在各成分都溶化后分裝前 要進(jìn)行的是 和 倒平板時(shí) 一般需冷卻至 左右 并且要在 附近操作 4 若用該培養(yǎng)液培養(yǎng)纖維素分解菌 應(yīng)除去的物質(zhì)是 至少應(yīng)加入的物質(zhì)是 為檢測纖維素分解菌的存在與否還應(yīng)加入 形成 色復(fù)合物 若產(chǎn)生 則證明有纖維素分解菌存在 解析 1 從培養(yǎng)基成分看 沒有瓊脂等凝固劑 屬于液體培養(yǎng)基 從用途上分析 加入青霉素可以殺死細(xì)菌 放線菌 選擇出霉菌 酵母菌等屬于選擇培養(yǎng)基 2 該生物以培養(yǎng)基中的 CH2O 作碳源 為異養(yǎng)型微生物 3 考查微生物培養(yǎng)的基本操作 4 培養(yǎng)纖維素分解菌 是以纖維素作碳源 故應(yīng)去除 CH2O 培養(yǎng)細(xì)菌應(yīng)去除能殺滅細(xì)菌的青霉素 可用剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物 檢測纖維素分解菌的存在 若存在 菌落周圍會(huì)形成透明圈 答案 1 液體選擇 2 異養(yǎng)型酵母菌或霉菌 3 CH2O 調(diào)整pH滅菌50 酒精燈火焰 4 青霉素和 CH2O 瓊脂和纖維素粉剛果紅紅透明圈 鏈一串 1 微生物的營養(yǎng) 關(guān)鍵一點(diǎn) 微生物之所以需要補(bǔ)充生長因子 是由于其體內(nèi)缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限 而對那些合成能力足以滿足自身需求的微生物 其培養(yǎng)基中則不需額外補(bǔ)充生長因子 2 培養(yǎng)基的類型 3 平板劃線法的注意事項(xiàng) 1 第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒接種環(huán)進(jìn)行滅菌 劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán) 每次灼燒目的如下表 2 灼燒接種環(huán)之后 要冷卻后才能伸入菌液 以免因溫度太高殺死菌種 3 劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連 4 劃線用力要大小適當(dāng) 防止用力過大將培養(yǎng)基劃破 通一類 1 右圖是微生物平板劃線示意圖 劃線的順序?yàn)?2345 下列操作方法正確的是 A 只需操作前將接種環(huán)放在火焰旁灼燒滅菌即可B 劃線操作需在火焰上進(jìn)行C 在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D 在12345區(qū)域中畫線前后都要對接種環(huán)滅菌 解析 操作的前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌 劃線操作需在火焰旁進(jìn)行 而不是在火焰上 所有的劃線區(qū)都有可能得到所需菌落 只是5區(qū)得到的菌落相對較純 答案 D 做一題 例2 從自然菌樣篩選較理想生產(chǎn)菌種的一般步驟是 采集菌樣 富集培養(yǎng) 純種分離 性能測定 1 不同微生物的生存環(huán)境不同 獲得理想微生物的第一步是從合適的環(huán)境中采集菌樣 然后再按一定的方法分離 純化 培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應(yīng)從 環(huán)境中采集 2 富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件 使其數(shù)量大大增加 從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法 對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇 的培養(yǎng)基 并在 條件下培養(yǎng) 3 下面兩圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解 請分析接種的具體方法 獲得圖A效果的接種方法是 獲得圖B效果的接種方法是 4 配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行 接種前要進(jìn)行 在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中 一定要注意在 條件下進(jìn)行 解析 1 嗜鹽菌就生活在高鹽環(huán)境中 如海灘等環(huán)境 2 耐高溫淀粉酶應(yīng)存在于以淀粉為唯一碳源且在高溫環(huán)境中生存的微生物體內(nèi) 3 從菌落分布的特點(diǎn)可以看出 A純化微生物的接種方法是稀釋涂布平板法 B純化微生物的接種方法是平板劃線法 4 培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng)先溶化 再調(diào)整pH值 然后滅菌 答案 1 海灘等高鹽 2 以淀粉為唯一碳源高溫 3 稀釋涂布平板法平板劃線法 4 pH調(diào)整高壓蒸汽滅菌無菌 鏈一串 1 幾種典型微生物的篩選方法 1 培養(yǎng)基中加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌 2 培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌 3 培養(yǎng)基中缺乏氮源時(shí) 可以分離固氮微生物 因?yàn)榉枪痰⑸锊荒茉诖伺囵B(yǎng)基上生存 4 當(dāng)培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí) 也具有分離效果 如當(dāng)石油是唯一碳源時(shí) 可以抑制不能利用石油的微生物的生長 使能夠利用石油的微生物生存 達(dá)到分離能消除石油污染的微生物的目的 5 改變微生物的培養(yǎng)條件 也可以達(dá)到分離微生物的目的 如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物 2 微生物篩選過程中必要的兩種對照培養(yǎng)基及其作用 關(guān)鍵一點(diǎn) 即使使用了選擇培養(yǎng)基 所得到的微生物也未必全為 目標(biāo)微生物 因此 常需對選擇培養(yǎng)基中菌落作進(jìn)一步鑒定 通一類 2 下表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方 下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 A 依物理性質(zhì)劃分 該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B 依用途劃分 該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基C 培養(yǎng)基中的唯一碳源是 CH2O 唯一氮源是NaNO3D 若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌 則應(yīng)除去 CH2O 再添加纖維素 解析 由于配方中沒有瓊脂 所以從物理性質(zhì)上劃分為液體培養(yǎng)基 由于配方中含有青霉素 對微生物有一定的篩選作用 所以從用途上劃分為選擇培養(yǎng)基 由于培養(yǎng)基中含有青霉素 纖維素分解菌不能生存 除去 CH2O 外 還應(yīng)除去青霉素 同時(shí)添加纖維素和瓊脂 答案 D 3 苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì) 自然界中存在著能降解苯酚的微生物 某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚 為了降解廢水中的苯酚 研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株 篩選的主要步驟如下圖所示 為土壤樣品 下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 A 圖中 培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源B 如果要測定 中活細(xì)菌數(shù)量 常采用稀釋涂布平板法C 若圖中 為對照實(shí)驗(yàn) 則其中應(yīng)以苯酚作為唯一的碳源D 使用平板劃線法可以在 上獲得單菌落 解析 用苯酚作為選擇培養(yǎng)基的特殊碳源 目的菌能夠存活 而其他菌因沒有可利用的碳源而不能生長 測定培養(yǎng)液中細(xì)菌數(shù)目多使用稀釋涂布平板法 若 為對照實(shí)驗(yàn) 則 應(yīng)含除苯酚外的其他碳源 以苯酚作為唯一碳源 使用稀釋涂布平板法或平板劃線法都可以在 上獲得單菌落 答案 C 做一題 例3 急性腸胃炎 手足口病分別是由細(xì)菌和病毒通過消化道進(jìn)入人體導(dǎo)致的 因此檢驗(yàn)飲用水的細(xì)菌含量和病毒含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施 請回答下列與檢驗(yàn)飲用水有關(guān)的問題 1 檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí) 通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋 然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng) 記錄菌落數(shù)量 這種方法稱為 在下面所示的四種菌落分布圖中 不可能是用該方法得到的是 2 用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對照組 為什么 3 如分別取0 1mL已稀釋103倍的水樣分別涂布到三個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng) 培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為55 56 57 則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為 4 已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣 現(xiàn)提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具塞試管 應(yīng)如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌 解析 純化大腸桿菌的方法 稀釋涂布平板法和平板劃線法 刪除偏差太大的數(shù)據(jù) 對剩下的多個(gè)培養(yǎng)數(shù)據(jù)進(jìn)行平均處理就可以得到水樣中的大腸桿菌數(shù) 大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣 通過密封培養(yǎng) 大腸桿菌可以進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生氣體 以氣泡的形式釋放出來 答案 1 稀釋涂布平板法D 2 需要因?yàn)樾枰袛嗯囵B(yǎng)基是否被雜菌污染 培養(yǎng)基滅菌是否合格 3 5 6 108 4 通過無菌操作向試管內(nèi)注入一定量待檢水樣 再注入已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將試管充滿 塞上塞子 混勻后置于37 恒溫箱培養(yǎng)24h 若試管內(nèi)有氣泡生成 則說明水樣中有大腸桿菌 鏈一串 微生物的數(shù)量測定1 實(shí)驗(yàn)流程 2 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法 1 顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 原理 利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板 在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量 方法 用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù) 缺點(diǎn) 不能區(qū)分死菌與活菌 2 間接計(jì)數(shù)法 活菌計(jì)數(shù)法 原理 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí) 培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落 來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌 通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù) 就能推測出樣品中大約含有多少活菌 操作 為了保證結(jié)果準(zhǔn)確 一般選擇菌落數(shù)在30 300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù) 計(jì)算公式 每克樣品中的菌株數(shù) C V M 其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù) V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積 mL M代表稀釋倍數(shù) 3 操作提示 1 將待測樣品經(jīng)一系列10倍梯度稀釋 然后選擇3個(gè)稀釋度的菌液 分別取0 1mL接種到已制備好的平板上 然后用無菌涂布器將菌液涂布在整個(gè)平板表面 放在適宜的溫度下培養(yǎng)計(jì)數(shù)菌落數(shù) 2 為使結(jié)果接近真實(shí)值 可將同一稀釋度菌液加到3個(gè)或3個(gè)以上的平板上 經(jīng)涂布 培養(yǎng) 計(jì)算出菌落平均數(shù) 關(guān)鍵一點(diǎn) 統(tǒng)計(jì)的菌落往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低 這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí) 平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 因此 統(tǒng)計(jì)結(jié)果用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示 通一類 4 通過實(shí)驗(yàn)測定土壤中的細(xì)菌數(shù)量 下列與此操作有關(guān)的敘述中 不正確的是 A 用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 經(jīng)高溫 高壓滅菌后倒平板B 取稀釋倍數(shù)分別為104 105和106倍的土壤稀釋液各0 1mL 分別涂布于各組平板上C 將培養(yǎng)皿倒置 37 恒溫培養(yǎng)12 24小時(shí)D 選擇菌落數(shù)在300個(gè)以上的培養(yǎng)皿進(jìn)行計(jì)數(shù) 解析 檢測土壤中細(xì)菌總數(shù) 用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 經(jīng)高溫 高壓滅菌后倒平板 取104 105 106倍的土壤稀釋液各0 1mL 分別涂布于各組平板上 將平板倒置 37 恒溫培養(yǎng)24 48小時(shí) 選擇菌落數(shù)在30 300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù) 答案 D 5 在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí) 某同學(xué)從對應(yīng)106倍稀釋的培養(yǎng)基中篩選出大約150個(gè)菌落 而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落 某同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生原因可能有 土樣不同 培養(yǎng)基污染 操作失誤 沒有設(shè)置對照A B C D 解析 某同學(xué)比其他同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)大許多 可能由于選取的土樣不同 培養(yǎng)基滅菌不徹底或操作過程中雜菌污染 也可能是操作失誤 如配制的培養(yǎng)基中混入其他含氮物質(zhì)等 答案 A 同學(xué)們 來學(xué)校和回家的路上要注意安全 同學(xué)們 來學(xué)校和回家的路上要注意安全